XTT細胞生存率アッセイプロトコール

次の製品の専用プロトコールです： XTT Cell Viability Kit #9095。

A. 試薬の調製

1. 実験直前に試薬を解凍してください。

注意：試薬を−20°Cで保存すると、沈殿が生じる可能性があります。試薬が使用前に沈殿物がみられないことを確認してください。必要に応じて試薬を37°Cに温めて溶解してください。

2. electron coupling solutionをXTT Reagentに加え (1:50容積比)、XTT検出溶液を調製してください。例えば、96-ウェルプレート1枚を解析する場合、XTT Reagent 5 mLとelectron coupling solution 0.1mLが必要です。

B. XTTアッセイ

1. XTT検出溶液50 µLを96-ウェルプレートの各ウェル (100–200 µL/ウェルの培地を含む) に加え、プレートをインキュベーターに戻してください。
2. 450 nmで吸光度を測定してください。

注意：このアッセイに最適なインキュベーション時間は、次のような実験設定️に依存します：細胞の種類、数、生物学的処理。最適なインキュベーション時間は、XTT検出溶液を加えた後に様々なタイムポイントで1つのプレートを測定することにより決定することができます (下図参照)。