Revision 4

#32112

Store at -20C

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877-616-CELL (2355)

[email protected]

Support:

877-678-TECH (8324)

3 Trask Lane | Danvers | Massachusetts | 01923 | USA

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

Applications:
W, IP, FC-FP

Reactivity:
H

Sensitivity:
Endogenous

MW (kDa):
22

Source/Isotype:
Rabbit IgG

UniProt ID:
#P57764

Entrez-Gene Id:
79792

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:1000 - 1:4000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #40402.

Specificity/Sensitivity

Cleaved Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit Monoclonal Antibody recognizes endogenous levels of the carboxy-terminal fragment of gasdermin D protein only when cleaved between Asp275 and Gly276.

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Gly276 of human gasdermin D protein.

Background

The gasdermin family, which includes GSDMA, GSDMB, GSDMC, GSDMD, and GSDME, has been shown to play a role in inflammation and cell death. Gasdermin D has been reported to have a critical role as a downstream effector of pyroptosis (1,2). Pyroptosis is a lytic type of cell death triggered by inflammasomes, multiprotein complexes assembled in response to pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) or danger-associated molecular patterns (DAMPs) that result in the activation of caspase-1 and subsequent cleavage of pro-inflammatory cytokines IL-1β and IL-18 (3). Gasdermin D was identified by two independent groups as a substrate of inflammatory caspases, caspase-1 and caspase-11/4/5, producing two fragments: GSDMD-N and GSDMD-C. Cleavage results in release of an intramolecular inhibitory interaction between the N- and C-terminal domains, allowing the N-terminal fragment GSDMD-N to initiate pyroptosis through the formation of pores on the plasma membrane (4-7).

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

W: Western Blotting IP: Immunoprecipitation FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: Human

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.

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使用に関する制限

使用に関する制限

法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、いかなる効力も効果も有しません。

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Western blot analysis of media or cell extracts from THP-1 cells differentiated with TPA (12-O-Tetradecanoylphorbol-13-Acetate) #4174 (50 ng/mL, 18 hr), untreated or treated with Lipopolysaccharides (LPS) #14011 (5 μg/mL, indicated times), using Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit mAb (upper), Gasdermin D (E5O4N) Rabbit mAb #69469 (middle), or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Western Blotting Image 1: Cleaved Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit Monoclonal Antibody
Immunoprecipitation of cleaved gasdermin D (Gly276) protein from extracts of media from THP-1 cells differentiated with TPA (12-O-Tetradecanoylphorbol-13-Acetate) #4174 (50 ng/mL, 18 hr) and then treated with Lipopolysaccharides (LPS) #14011 (5 μg/mL, 18 hr). Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is Cleaved Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using Cleaved Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit mAb. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as a secondary antibody.
Immunoprecipitation Image 1: Cleaved Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit Monoclonal Antibody
Flow cytometric analysis of fixed/permeabilized THP-1 cells differentiated with TPA (12-O-Tetradecanoylphorbol-13-Acetate) #4174 (50 ng/mL, 24 hr; rest 48 hr), and subsequently untreated (blue) or treated with Lipopolysaccharides (LPS) #14011 (5 µg/mL, 6 hr; green), using Cleaved Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit mAb (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 was used as a secondary antibody.
Flow Cytometry Image 1: Cleaved Gasdermin D (Gly276) (E9U7H) Rabbit Monoclonal Antibody
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