Revision 1
Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-Stat1 (Tyr701) (58D6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 9174 40 µl Rabbit IgG
Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 4323 40 µl 86 kDa Rabbit IgG
Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 3939 40 µl Rabbit IgG
Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 2975 40 µl Rabbit IgG

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit provides an economical means to study the activation status of members of the Stat family of proteins without the need for a fluorescent secondary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Jaks (Janus Kinases) and Stats (Signal Transducers and Activators of Transcription) are utilized by receptors for a wide variety of ligands including cytokines, hormones, growth factors, and neurotransmitters. Jaks, activated via autophosphorylation following ligand-induced receptor aggregation, phosphorylate tyrosine residues on associated receptors, Stat molecules, and other downstream signaling proteins (1,2). The phosphorylation of Stat proteins at conserved tyrosine residues activates SH2-mediated dimerization followed rapidly by nuclear translocation. Stat dimers bind to interferon response element (IRE) and gamma interferon-activated sequence (GAS) DNA elements, resulting in the transcriptional regulation of downstream genes (1,2). The remarkable range and specificity of responses regulated by the Stat family members is determined in part by the tissue-specific expression of different cytokine receptors, Jak and Stat family members (2,3), and by the combinatorial coupling of various Stat members to different receptors. Stat1 is activated in response to a large number of ligands (4) and is essential for responsiveness to IFN-α and IFN-γ (5,6). Stat3 is an important signaling molecule for many cytokines and growth factor receptors (4) and is required for murine fetal development (7). Stat5 is activated in response to a wide variety of ligands including IL-2, GM-CSF, growth hormone, and prolactin. Phosphorylation at Tyr694 is obligatory for Stat5 activation (8,9).

  1. Darnell, J.E. et al. (1994) Science 264, 1415-21.
  2. Leonard, W.J. and O'Shea, J.J. (1998) Annu Rev Immunol 16, 293-322.
  3. Caldenhoven, E. et al. (1996) J Biol Chem 271, 13221-7.
  4. Heim, M.H. (1999) J Recept Signal Transduct Res 19, 75-120.
  5. Durbin, J.E. et al. (1996) Cell 84, 443-50.
  6. Meraz, M.A. et al. (1996) Cell 84, 431-42.
  7. Takeda, K. et al. (1997) Proc Natl Acad Sci U S A 94, 3801-4.
  8. Gouilleux, F. et al. (1994) EMBO J 13, 4361-9.
  9. Wakao, H. et al. (1994) EMBO J 13, 2182-91.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    使用に関する制限

    法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

    研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

    Revision 1
    #12348

    Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit

    Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Confocal immunofluorescent analysis of Cos cells using GAPDH (14C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #3906 (green, left) compared to concentration matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate (green, right). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).
    Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Flow cytometric analysis of TF-1 cells untreated (blue) or treated with hGM-CSF (100 ng/ml, 15 min; green) using Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #2975 (dashed lines).
    Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Flow cytometric analysis of Jurkat cells, untreated (blue) or treated with IFN-alpha #8927 (100ng/ml, 30min; green) using Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) (solid lines) or a concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #2975 (dashed lines).
    Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    Flow cytometric analysis of Jurkat cells untreated (blue) or treated with IFN-alpha (100ng/ml, 5 min; green) using Phospho-Stat1 (Tyr701) (58D6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #2975 (dashed lines).
    Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    Flow cytometric analysis of Jurkat cells, using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) (red) compared to Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4803, untreated (blue) or IFN-α-treated (green).
    Stat Family Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    Flow cytometric analysis of Jurkat cells, using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) (red) compared to Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4071, untreated (green) or LY294002- and wortmannin-treated (blue).