Revision 3
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

FC-FP, FC-L

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

Source/Isotype:

Mouse IgG1 kappa

UniProt ID:

#P08637

Entrez-Gene Id:

2214

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:20
Flow Cytometry (Live) 1:20

Storage

Supplied in 10 mM NaH2PO4, 150 mM NaCl, 0.09% NaN3, 0.1% gelatin, pH 7.2. This product is stable for 6 months when stored at 4ºC. Do not aliquot the antibody. Protect from light. Do not freeze.

Specificity / Sensitivity

CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate) recognizes endogenous levels of total CD16 protein. This antibody detects an epitope within the extracellular domain.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

This monoclonal antibody was purified from tissue culture supernatant via affinity chromatography. The purified antibody was conjugated under optimal conditions, with unreacted dye removed from the preparation.

Product Description

This Cell Signaling Technology antibody is conjugated to PE-Cy7® and tested in-house for direct flow cytometric analysis in human cells.

Background

CD64 (FcgammaRI), CD32 (FcgammaRII), and CD16 (FcgammaRIII) are three classes of the immunoglobulin superfamily. CD64 has a high affinity for IgG with three Ig-like domains while CD32 and CD16 have low affinities with two Ig-like domains. Two genes encode CD16-A and CD16-B resulting only in a 6 amino acid difference in their ectodomains. However, CD16-A has a transmembrane anchor versus CD16-B, which has a glycosylphosphatidylinositol (1). CD64, CD32, and CD16 are membrane glycoproteins that are expressed by all immunologically active cells and trigger various immune functions (activate B cells, phagocytosis, antibody-dependent cellular cytotoxicity, immune complex clearance, and enhancement of antigen presentation) (2). CD16 cross-linking induces tyrosine phosphorylation (Tyr394) of Lck in NK cells (3). CD32 has tyrosine-based activation motifs in the cytoplasmic domain in contrast to CD16, which associates with molecules possessing these motifs (1).
CD16A is expressed by NK cells, macrophages, and a subset of monocytes, while CD16B is expressed by neutrophils (4). CD16 is commonly used in combination with CD56 to characterize NK cells, with CD16 identifying NK cells capable of cytotoxicity (5).The 3G8 antibody is widely used as a marker of CD16 expression on the cell types mentioned above (6).

  1. Maenaka, K. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 44898-44904.
  2. Fridman, W. H. et al. (1992) Immunol. Rev. 125, 49-76.
  3. Pignata, C. et al. (1993) J. Immunol. 151, 6794-6800.
  4. Pincetic, A. et al. (2014) Nat Immunol 15, 707-16.
  5. Nagler, A. et al. (1989) J Immunol 143, 3183-91.
  6. Fleit, H.B. et al. (1982) Proc Natl Acad Sci U S A 79, 3275-9.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Applications Key

FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) FC-L: Flow Cytometry (Live)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Cy and CyDye are registered trademarks of GE Healthcare.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#23290

CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate)

Flow Cytometry Image 1: CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate) Expand Image
Flow cytometric analysis of live human peripheral blood mononuclear cells using CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate) and co-stained with NCAM1 (CD56) (MY31) Mouse mAb (APC Conjugate) #51997 (right), compared to concentration-matched Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (PE-Cy7® Conjugate) #79339 (left).