Revision 5
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

IF-F, FC-FP, FC-L

REACTIVITY:

M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

Source/Isotype:

Rat IgG2b kappa

UniProt ID:

#P22646, #P11942

Entrez-Gene Id:

12501, 12502

Product Information

Product Usage Information

For optimal flow cytometry results, we recommend 0.5 μg of antibody per test.

Application Dilution
Immunofluorescence (Frozen) 1:50 - 1:200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:40
Flow Cytometry (Live) 1:40

Storage

Supplied in 10 mM NaH2PO4, 150 mM NaCl, 0.09% NaN3, 0.1% gelatin, pH 7.2. This product is stable for 12 months when stored at 4ºC. Do not aliquot the antibody. Protect from light. Do not freeze.

Specificity / Sensitivity

CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor 710 Conjugate) recognizes endogenous levels of total CD3ε, CD3γ, and CD3δ proteins. This antibody detects epitopes within the extracellular domains.

Species Reactivity:

Mouse

Source / Purification

This monoclonal antibody was purified from tissue culture supernatant via affinity chromatography. The purified antibody was conjugated under optimal conditions, with unreacted dye removed from the preparation.

Product Description

This Cell Signaling Technology antibody is conjugated to redFluor 710 and tested in-house for direct flow cytometric analysis in mouse cells.

Background

When T cells encounter antigens via the T cell receptor (TCR), information about the quantity and quality of antigens is relayed to the intracellular signal transduction machinery (1). This activation process depends mainly on CD3 (Cluster of Differentiation 3), a multiunit protein complex that directly associates with the TCR. CD3 is composed of four polypeptides: ζ, γ, ε, and δ. Each of these polypeptides contains at least one immunoreceptor tyrosine-based activation motif (ITAM) (2). Engagement of the TCR complex with foreign antigens induces tyrosine phosphorylation in the ITAM motifs and phosphorylated ITAMs function as docking sites for signaling molecules such as ZAP-70 and the p85 subunit of PI-3 kinase (3,4). TCR ligation also induces a conformational change in CD3ε, such that a proline region is exposed and then associates with the adaptor protein Nck (5).

  1. Kuhns, M.S. et al. (2006) Immunity 24, 133-139.
  2. Pitcher, L.A. and van Oers, N.S. (2003) Trends Immunol. 24, 554-560.
  3. Osman, N. et al. (1996) Eur. J. Immunol. 26, 1063-1068.
  4. Hatada, M.H. et al. (1995) Nature 377, 32-38.
  5. Gil, D. et al. (2002) Cell 109, 901-912.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Applications Key

IF-F: Immunofluorescence (Frozen) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) FC-L: Flow Cytometry (Live)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 5
#26582

CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor 710 Conjugate)

Immunofluorescence Image 1: CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor™ 710 Conjugate) Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of fixed frozen mouse lung, labeled with CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor 710 Conjugate) #26582 (red) and co-labeled with CD45 (D3F8Q) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #19581 (green pseudocolor) and DAPI #4083 (blue).
Immunofluorescence Image 2: CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor™ 710 Conjugate) Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of fixed frozen mouse thymus, labeled with CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor 710 Conjugate) #26582 (red), Iba1/AIF-1 (E4O4W) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #20825 (gray pseudocolor), CD45 (D3F8Q) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #19581 (green pseudocolor), and DAPI #4083 (blue).
Flow Cytometry Image 1: CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor™ 710 Conjugate) Expand Image
Flow cytometric analysis of live mouse splenocytes using CD3 (17A2) Rat mAb (redFluor 710 Conjugate) (solid line) compared to concentration-matched Rat (LTF-2) mAb IgG2b Isotype Control (redFluor 710 Conjugate) #90283 (dashed line).