Revision 4
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

All

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

Source/Isotype:

Mouse IgG1

UniProt ID:

#P62987, #P0CG48, #P0CG47, #P62979

Entrez-Gene Id:

7311, 7316, 7314, 6233

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 136 mM NaCl, 2.6 mM KCl, 12 mM sodium phosphate (pH 7.4) dibasic, 2 mg/ml BSA, and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Specificity / Sensitivity

Ubiquitin (P4D1) Mouse mAb (HRP Conjugate) detects ubiquitin, polyubiquitin, and ubiquitinated proteins. This antibody may cross-react with recombinant NEDD8.

Species Reactivity:

All Species Expected

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with 1-76 full-length bovine ubiquitin.

Product Description

This Cell Signaling Technology antibody is conjugated to the carbohydrate groups of horseradish peroxidase (HRP) via its amine groups. The HRP conjugated antibody is expected to exhibit the same species cross-reactivity as the unconjugated Ubiquitin (P4D1) Mouse mAb #3936.

Background

Ubiquitin is a conserved polypeptide unit that plays an important role in the ubiquitin-proteasome pathway. Ubiquitin can be covalently linked to many cellular proteins by the ubiquitination process, which targets proteins for degradation by the 26S proteasome. Three components are involved in the target protein-ubiquitin conjugation process. Ubiquitin is first activated by forming a thiolester complex with the activation component E1; the activated ubiquitin is subsequently transferred to the ubiquitin-carrier protein E2, then from E2 to ubiquitin ligase E3 for final delivery to the epsilon-NH2 of the target protein lysine residue (1-3). The ubiquitin-proteasome pathway has been implicated in a wide range of normal biological processes and in disease-related abnormalities. Several proteins such as IκB, p53, cdc25A, and Bcl-2 have been shown to be targets for the ubiquitin-proteasome process as part of regulation of cell cycle progression, differentiation, cell stress response, and apoptosis (4-7).

  1. Ciechanover, A. (1998) EMBO J 17, 7151-60.
  2. Hochstrasser, M. (2000) Nat Cell Biol 2, E153-7.
  3. Hochstrasser, M. (2000) Science 289, 563-4.
  4. Bernardi, R. et al. (2000) Oncogene 19, 2447-54.
  5. Aberle, H. et al. (1997) EMBO J 16, 3797-804.
  6. Salomoni, P. and Pandolfi, P.P. (2002) Nat Cell Biol 4, E152-3.
  7. Jesenberger, V. and Jentsch, S. (2002) Nat Rev Mol Cell Biol 3, 112-21.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 4
#14049

Ubiquitin (P4D1) Mouse mAb (HRP Conjugate)

Western Blotting Image 1: Ubiquitin (P4D1) Mouse mAb (HRP Conjugate) Expand Image
Western blot analysis of HeLa cells, untreated (-) or treated with the 26S proteasome inhibitor MG-132 #2194 (50 µM, 90 min; +), using Ubiquitin (P4D1) Mouse mAb (HRP Conjugate).