Revision 1

#7639Store at -80C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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UniProt ID:

#Q9P289

Entrez-Gene Id:

51765

Product Information

Storage

Antibodies are supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Do not aliquot the antibodies. Peptides are supplied at 6 µM in 0.001% DMSO. Enzymes are supplied in 50 mM Tris-HCL (pH 8.0), 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 15 mM reduced glutathione and 20% glycerol.
Store at –80°C.
Keep enzymes on ice during use.
Avoid repeated freeze-thaw cycles.

Source / Purification

The GST-Kinase fusion protein was produced using a baculovirus expression system with a construct expressing full-length human Mst4 (Met1-Pro416) (GenBank Accession No. NM-016542) with an amino-terminal GST tag. The protein was then purified by one-step affinity chromatography using glutathione-agarose.

Product Description

The kit provides a means of performing kinase activity assays with recombinant active human Mst4 kinase. It includes active Mst4 kinase (supplied as a GST fusion protein), a biotinylated peptide substrate and a phospho-serine/threonine antibody for detection of the phosphorylated form of the substrate peptide.
Molecular Formula Peptide substrate, Ezrin (Thr567)/Radixin (Thr564)/Moesin (Thr558) Biotinylated Peptide #1344: 1,958 Daltons, GST-Mst4 Kinase: 76 kDa.

Background

MST kinases, members of the STE20 family of kinases, are upstream activators of MAPK pathways that regulate processes such as apoptosis, morphogenesis and cytoskeletal rearrangements. The amino-terminal kinase domains of MST kinases are highly similar to the kinase domains of yeast STE20 kinase and other p21-activated kinases (1). The carboxy-terminal regions of MST1 and MST2 contain dimerization and inhibitory domains (1-3). Dimerization and phosphorylation at the activation loop results in translocation of MST1 from the cytosol to the nucleus (3). Growing evidence indicates that MST1, MST2 and MST3 are activated by apoptotic signals as well as other stress conditions (4-6). Complete activation of MST1 requires both phosphorylation and caspase-mediated cleavage (4). Sequence alignment of the activation loop of the GCK family indicates that Thr183 of MST1 and Thr180 of MST2 are the conserved residues and are critical for activation of the kinases. Activated MST kinases may rely on p38 MAPK and JNK pathways to amplify apoptotic signals (5). Phosphorylation at Ser327 of MST1, which is close to the caspase-3 recognition site, inhibits caspase-mediated cleavage (4).

  1. Dan, I. et al. (2001) Trends Cell Biol 11, 220-30.
  2. Creasy, C.L. et al. (1996) J Biol Chem 271, 21049-53.
  3. Lee, K.K. and Yonehara, S. (2002) J Biol Chem 277, 12351-8.
  4. Graves, J.D. et al. (2001) J Biol Chem 276, 14909-15.
  5. Lee, K.K. et al. (2001) J Biol Chem 276, 19276-85.
  6. Graves, J.D. et al. (1998) EMBO J 17, 2224-34.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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