Revision 1
Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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Product Information

Product Description

Cell Signaling Technology's patented PhosphoScan® Technology allows for the purification and identification of phosphorylation sites in cellular proteins when coupled with LC tandem mass spectrometry. In this assay, PhosphoScan® (P-Tyr-100) mAb Beads are used to specifically enrich phospho-tyrosine-containing peptides. Cells are lysed in a urea-containing buffer, and cellular proteins are digested by proteases and fractionated by reversed-phase solid-phase extraction. Peptides are then subjected to immunoaffinity purification using PhosphoScan® (P-Tyr-100) mAb Beads. Overnight incubation ensures high-affinity binding of phospho-tyrosine-containing peptides to P-Tyr-100 beads. Unbound peptides are removed through washing, and phospho-tyrosine-containing peptides are eluted with dilute acid. Reversed-phase chromatography is performed on microtips to separate phosphopeptides from antibody and to concentrate them for LC tandem mass spectrometry.

Background

PTMScan® Technology employs a proprietary methodology from Cell Signaling Technology for peptide enrichment by immunoprecipitation using a specific bead-conjugated antibody in conjunction with liquid chromatography (LC) tandem mass spectrometry (MS/MS) for quantitative profiling of post-translational modification (PTM) sites in cellular proteins. These include phosphorylation (PhosphoScan®), ubiquitination (UbiScan®), acetylation (AcetylScan®), and methylation (MethylScan®), among others. PTMScan® enables researchers to isolate, identify, and quantitate large numbers of post-translationally modified cellular peptides with a high degree of specificity and sensitivity, providing a global overview of PTMs in cell and tissue samples without preconceived biases about where these modified sites occur. For more information on PTMScan® services, please visit www.cellsignal.com/services/index.html.

Tyrosine phosphorylation plays a key role in cellular signaling (2). In cancer, unregulated tyrosine kinase activity can drive malignancy and tumor formation by generating inappropriate proliferation and survival signals (3). Current phosphoproteomic approaches generally reveal only small numbers of tyrosine phosphorylation sites, in keeping with the low level of phosphotyrosine relative to phosphoserine and phosphothreonine residues (4). PhosphoScan® Kit, based on CST's published method (1,5), isolates large numbers of cellular phosphotyrosine-containing peptides. This allows the investigator to obtain a global overview of tyrosine phosphorylation in the cell, covering many classes of proteins without preconceived biases about where tyrosine phosphorylation sites will be found.

  1. Schlessinger, J. (2000) Cell 103, 211-25.
  2. Blume-Jensen, P. and Hunter, T. (2001) Nature 411, 355-65.
  3. Mann, M. et al. (2002) Trends Biotechnol 20, 261-8.
  4. Rush, J. et al. (2003) U.S. Patent Publication , 20030044848.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
PhosphoScan is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#7902

Phospho-Tyrosine Mouse mAb (P-Tyr-100) Beads (for use with PhosphoScan® Technology)