Revision 4

#7082Store at +4C

1 Kit

(96 assays)

Species Cross Reactivity

H

UniProt ID:

#P06213

Entrez-Gene Id:

#3643

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Color Storage Temp
Insulin Receptor β Rabbit mAb Coated Microwells 18872 96 tests +4C
Phospho Tyrosine Mouse Detection mAb 12982 1 ea Green (Lyophilized) +4C
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody (ELISA Formulated) 13304 1 ea Red (Lyophilized) +4C
Detection Antibody Diluent 13339 11 ml Green +4C
HRP Diluent 13515 11 ml Red +4C
TMB Substrate 7004 11 ml +4C
STOP Solution 7002 11 ml +4C
Sealing Tape 54503 2 ea +4C
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 25 ml +4C
ELISA Sample Diluent 11083 25 ml Blue +4C
Cell Lysis Buffer (10X) 9803 15 ml -20C

*The microwell plate is supplied as 12 8-well modules - Each module is designed to break apart for 8 tests.

Description

The PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (panTyr) Sandwich ELISA Kit from Cell Signaling Technology is a solid phase sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) that detects transfected levels of tyrosine-phosphorylated insulin receptor β protein. An Insulin Receptor β Rabbit mAb has been coated on the microwells. After incubation with cell lysates, Insulin receptor β protein (phospho and nonphospho) is captured by the coated antibody. Following extensive washing, a phospho-tyrosine mouse mAb is added to detect captured tyrosine-phosphorylated insulin receptor β protein. Anti-mouse IgG, HRP-linked antibody is then used to recognize the bound detection antibody. HRP substrate TMB is added to develop color. The magnitude of the absorbance for this developed color is proportional to the quantity of insulin receptor β protein phosphorylated on tyrosine.

*Antibodies in this kit are custom formulations specific to kit.

Specificity/Sensitivity

PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (panTyr) Sandwich ELISA Kit #7082 detects transfected levels of human Insulin Receptor β protein phosphorylated at tyrosine, as shown in Figure 1. The kit sensitivity is shown in Figure 2. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species.

Background

Insulin receptor (INSR) is a membrane receptor tyrosine kinase. The receptor molecule consists of a disulfide linked heterodimer. The α subunit is a 135 kDa extracellular fragment, and the β subunit is a 95 kDa fragment containing an extracellular domain, a single transmembrane domain, and an intracellular tyrosine kinase domain (1). Insulin ligand binding to this receptor results in receptor autophosphorylation and tyrosine kinase activation. INSR catalyzes the tyrosine phosphorylation of molecules such as IRS, Gab1, Shc, and Cbl, which further activate the downstream MAPK, PI3K, and TC10 pathways. This eventually leads to increases in glucose uptake and metabolism as well as cell growth (2,3). INSR has peptide substrate specificity similar to other receptor tyrosine kinase members, preferring acidic residues at the -1 to -4 positions and large hydrophobic amino acids at positions +1 and +3 (4).

  1. Yip, C.C. and Ottensmeyer, P. (2003) J Biol Chem 278, 27329-32.
  2. Saltiel, A.R. and Pessin, J.E. (2002) Trends Cell Biol 12, 65-71.
  3. Zick, Y. (2001) Trends Cell Biol 11, 437-41.
  4. Songyang, Z. and Cantley, L.C. (1995) Trends Biochem Sci 20, 470-5.

Background References

    Cross-Reactivity Key

    H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    PathScan is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    使用に関する制限

    法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

    研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

    Revision 4
    #7082

    PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (panTyr) Sandwich ELISA Kit

    PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (panTyr) Sandwich ELISA Kit: Image 1 Expand Image
    Figure 1: Treatment of CHO-IR/IRS-1 cells with insulin stimulates tyrosine phosphorylation of Insulin Receptor β which is detected by the PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (panTyr) Sandwich ELISA Kit #7082 (top, right). Similar levels of Insulin Receptor β protein from both nonphospho or phospho lysates are detected by PathScan® Total Insulin Receptor β Sandwich ELISA Kit #7069 (top, left). Absorbance at 450 nm is shown in the top figure while corresponding western blots using Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135/1136)/Insulin Receptor β (Tyr1150/1151) (19H7) Rabbit mAb #3024 (right panel) or Insulin Receptor β Antibody #3025 (left panel) are shown in the bottom figure. CHO-IR/IRS-1 cells stably overexpress the tranfected human insulin receptor and rat IRS-1.
    PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (panTyr) Sandwich ELISA Kit: Image 2 Expand Image
    Figure 2: The relationship between protein concentration of lysates from untreated and insulin-treated CHO-IR/IRS-1 cells and the absorbance at 450 nm is shown. After starvation, CHO-IR/IRS-1 cells (85% confluence) were treated with insulin (100 nM, 2 min at 37°C) and then lysed.