Revision 1

#8951Store at +4C

 

()

Species Cross Reactivity

H

UniProt ID:

#P00533

Entrez-Gene Id:

#1956

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Color Storage Temp
TMB Substrate 7004 11 ml Colorless +4C
STOP Solution 7002 11 ml Colorless +4C
Sealing Tape 54503 2 ea +4C
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 25 ml Colorless +4C
ELISA Sample Diluent 11083 25 ml Blue +4C
Cell Lysis Buffer (10X) 9803 15 ml Yellowish -20C

*The microwell plate is supplied as 12 8-well modules - Each module is designed to break apart for 8 tests.

Description

The PathScan® EGF Receptor (L858R Mutant Specific) Sandwich ELISA Kit is a solid phase sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) that detects endogenous levels of EGF receptor L858R mutant protein. An EGF receptor (L858R Mutant Specific) rabbit mAb has been coated on the microwells. After incubation with cell lysates, EGF receptor L858R mutant protein is captured by the coated antibody. Following extensive washing, an EGF receptor mouse monoclonal detection antibody is added to detect captured EGF receptor mutant protein. Anti-mouse IgG, HRP-linked antibody is then used to recognize the bound detection antibody. HRP substrate, TMB, is added to develop color. The magnitude of the absorbance for this developed color is proportional to the quantity of EGF receptor L858R mutant protein.
Antibodies in kit are custom formulations specific to kit.

Specificity/Sensitivity

PathScan® EGF Receptor (L858R Mutant Specific) Sandwich ELISA Kit #8951 detects endogenous levels of EGF receptor L858R mutant protein in human cells, as shown in Figure 1. The kit sensitivity is shown in Figure 2. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species.

Background

The epidermal growth factor (EGF) receptor is a 170 kDa transmembrane tyrosine kinase that belongs to the HER/ErbB protein family. Research studies have shown that somatic mutations in the tyrosine kinase domain of EGF receptor (EGFR) are present in a subset of lung adenocarcinomas that respond to EGFR inhibitors, such as gefitinib and erlotinib (1-3). Two types of mutations account for approximately 90% of mutated cases: a specific point mutation, L858R, that occurs in exon 21 and short in-frame deletions in exon 19 (4,5). The most frequent exon 19 deletion is E746-A750, accounting for 90% of lesions at this site, although some rare variants occur.

  1. Lynch, T.J. et al. (2004) N Engl J Med 350, 2129-39.
  2. Pao, W. et al. (2004) Proc Natl Acad Sci USA 101, 13306-11.
  3. Haber, D.A. et al. (2005) Cold Spring Harb Symp Quant Biol 70, 419-26.
  4. Kosaka, T. et al. (2004) Cancer Res 64, 8919-23.
  5. Riely, G.J. et al. (2006) Clin Cancer Res 12, 7232-41.

Background References

    Cross-Reactivity Key

    H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    PathScan is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    使用に関する制限

    法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

    研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

    Revision 1
    #8951

    PathScan® EGF Receptor (L858R Mutant Specific) Sandwich ELISA Kit

    PathScan® EGF Receptor (L858R Mutant Specific) Sandwich ELISA Kit: Image 1 Expand Image
    Figure 1. EGFR mutant protein from H3255 cells can be detected by PathScan® EGF Receptor (L858R Mutant Specific) Sandwich ELISA Kit #8951. However, this kit cannot detect wild type EGFR protein from A-431 cells or EGFR E746-A750del protein from HCC827 cells. EGFR (either wild type or mutant) from these three cell lines can be detected by PathScan® Total EGF Receptor Sandwich ELISA Kit #7250, but no detection is found in MCF7 cells, which lack expression of EGFR. The absorbance readings at 450 nm are shown in the top figure, while the corresponding western blots using EGF Receptor (L858R Mutant Specific) (43B2) Rabbit mAb #3197, EGF Receptor (E746-A750del Specific) (6B6) XP® Rabbit mAb #2085, or EGF Receptor (C74B9) Rabbit mAb #2646 are shown in the bottom figure.
    PathScan® EGF Receptor (L858R Mutant Specific) Sandwich ELISA Kit: Image 2 Expand Image
    Figure 2. The relationship between protein concentration of lysates from A-431, H3255, or HCC827 cells and the absorbance at 450 nm is shown. A-431, H3255, or HCC827 cells (85% confluence) were harvested and then lysed.