Revision 3

#92065Store at +4C

1 Kit

(96 assays)

Species Cross Reactivity

H

UniProt ID:

#Q16236

Entrez-Gene Id:

#4780

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Color
FastScan ELISA Microwell Strip Plate, 96 Well 53257 96 tests
NRF2 Rabbit Capture mAb 19493 1 ea Green (Lyophilized)
NRF2 Rabbit HRP-linked mAb 39940 1 ea Red (Lyophilized)
FastScan ELISA Capture Antibody Diluent 16076 3 ml Green
FastScan ELISA HRP Antibody Diluent 28120 3 ml
TMB Substrate 7004 11 ml
STOP Solution 7002 11 ml
Sealing Tape 54503 1 ea
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 25 ml
FastScan ELISA Cell Extraction Buffer (5X) 69905 10 ml
FastScan ELISA Cell Extraction Enhancer Solution (50X) 25243 1 ml
FastScan ELISA Kit #92065 Positive Control Type 2 53729 1 ea

*The microwell plate is supplied as 12 8-well modules - Each module is designed to break apart for 8 tests.

Description

The FastScan Total NRF2 ELISA Kit is a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) that detects endogenous levels of NRF2. To perform the assay, sample is incubated with a capture antibody conjugated with a proprietary tag and a second detection antibody linked to HRP, forming a sandwich with NRF2 in solution. This entire complex is immobilized to the plate via an anti-tag antibody. The wells are then washed to remove unbound material. TMB is then added. The magnitude of observed signal is proportional to the quantity of NRF2.

*Antibodies in this kit are custom formulations specific to kit.

IMPORTANT: This FastScan ELISA Kit requires 4 washes at Step 6 of the protocol.

Specificity/Sensitivity

The FastScan Total NRF2 ELISA Kit detects endogenous levels of NRF2, as shown in Figure 1. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species.

Background

The nuclear factor-like 2 (NRF2) transcriptional activator binds antioxidant response elements (ARE) of target gene promoter regions to regulate expression of oxidative stress response genes. Under basal conditions, the NRF2 inhibitor INrf2 (also called KEAP1) binds and retains NRF2 in the cytoplasm where it can be targeted for ubiquitin-mediated degradation (1). Small amounts of constitutive nuclear NRF2 maintain cellular homeostasis through regulation of basal expression of antioxidant response genes. Following oxidative or electrophilic stress, KEAP1 releases NRF2, thereby allowing the activator to translocate to the nucleus and bind to ARE-containing genes (2). The coordinated action of NRF2 and other transcription factors mediates the response to oxidative stress (3). Altered expression of NRF2 is associated with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) (4). NRF2 activity in lung cancer cell lines directly correlates with cell proliferation rates, and inhibition of NRF2 expression by siRNA enhances anti-cancer drug-induced apoptosis (5).

  1. Cullinan, S.B. et al. (2004) Mol Cell Biol 24, 8477-86.
  2. Nguyen, T. et al. (2005) J Biol Chem 280, 32485-92.
  3. Jaiswal, A.K. (2004) Free Radic Biol Med 36, 1199-207.
  4. Suzuki, M. et al. (2008) Am J Respir Cell Mol Biol 39, 673-82.
  5. Homma, S. et al. (2009) Clin Cancer Res 15, 3423-32.

Background References

    Cross-Reactivity Key

    H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    FastScan™ ELISA is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patents 9,086,407, 9,261,500, and 9,476,874, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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