Revision 3

#7385Store at +4C

1 Kit

(96 assays)

Species Cross Reactivity

H M R

UniProt ID:

#P16220

Entrez-Gene Id:

#1385

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Color Storage Temp
CREB Rabbit mAb Coated Microwells 57970 96 tests +4C
Phospho-CREB (Ser133) Mouse Detection mAb 13956 1 ea Green (Lyophilized) +4C
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody (ELISA Formulated) 13304 1 ea Red (Lyophilized) +4C
Detection Antibody Diluent 13339 11 ml Green +4C
HRP Diluent 13515 11 ml Red +4C
TMB Substrate 7004 11 ml +4C
STOP Solution 7002 11 ml +4C
Sealing Tape 54503 2 ea +4C
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 25 ml +4C
ELISA Sample Diluent 11083 25 ml Blue +4C
PathScan® Sandwich ELISA Lysis Buffer (1X) 7018 30 ml -20C

*The microwell plate is supplied as 12 8-well modules - Each module is designed to break apart for 8 tests.

Description

The PathScan® Phospho-CREB (Ser133) Sandwich ELISA Kit is a solid phase sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) that detects endogenous levels of CREB when phosphorylated at Ser133. A CREB rabbit antibody has been coated onto the microwells. After incubation with cell lysates, CREB protein (phosphorylated and nonphospho) is captured by the coated antibody. Following extensive washing, a phospho-CREB (Ser133) mouse monoclonal detection antibody is added to detect the captured phospho-CREB (Ser133) protein. HRP-linked anti-mouse IgG is then used to recognize the bound detection antibody. HRP substrate, TMB, is added to develop color. The magnitude of the absorbance for the developed color is proportional to the quantity of CREB phosphorylated at Ser133.

*Antibodies in this kit are custom formulations specific to kit.

Specificity/Sensitivity

PathScan® Phospho-CREB (Ser133) Sandwich ELISA Kit #7385 detects endogenous levels of CREB protein when phosphorylated at Ser133 as shown in Figure 1. Kit sensitivity is shown in Figure 2. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species. This kit also detects the phosphorylated form of the CREB-related protein ATF-1.

Background

CREB is a bZIP transcription factor that activates target genes through cAMP response elements. CREB is able to mediate signals from numerous physiological stimuli, resulting in regulation of a broad array of cellular responses. While CREB is expressed in numerous tissues, it plays a large regulatory role in the nervous system. CREB is believed to play a key role in promoting neuronal survival, precursor proliferation, neurite outgrowth, and neuronal differentiation in certain neuronal populations (1-3). Additionally, CREB signaling is involved in learning and memory in several organisms (4-6). CREB is able to selectively activate numerous downstream genes through interactions with different dimerization partners. CREB is activated by phosphorylation at Ser133 by various signaling pathways, including Erk, Ca2+, and stress signaling. Some of the kinases involved in phosphorylating CREB at Ser133 are p90RSK, MSK, CaMKIV, and MAPKAPK-2 (7-9).

  1. Lonze, B.E. et al. (2002) Neuron 34, 371-85.
  2. Lee, M.M. et al. (1999) J Neurosci Res 55, 702-12.
  3. Redmond, L. et al. (2002) Neuron 34, 999-1010.
  4. Dash, P.K. et al. (1990) Nature 345, 718-21.
  5. Yin, J.C. et al. (1994) Cell 79, 49-58.
  6. Guzowski, J.F. and McGaugh, J.L. (1997) Proc Natl Acad Sci USA 94, 2693-8.
  7. Xing, J. et al. (1998) Mol Cell Biol 18, 1946-55.
  8. Ribar, T.J. et al. (2000) J Neurosci 20, RC107.
  9. Tan, Y. et al. (1996) EMBO J 15, 4629-42.

Background References

    Cross-Reactivity Key

    H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    PathScan is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    使用に関する制限

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    Revision 3
    #7385

    PathScan® Phospho-CREB (Ser133) Sandwich ELISA Kit

    PathScan® Phospho-CREB (Ser133) Sandwich ELISA Kit: Image 1 Expand Image
    Figure 1. Treatment of SK-N-MC cells with forskolin stimulates phosphorylation of CREB at Ser133, detected by the PathScan® Phospho-CREB (Ser133) Sandwich ELISA Kit #7385, but does not affect the levels of total CREB detected by PathScan® Total CREB Sandwich ELISA Kit #7390. SK-N-MC cells (80-90% confluent) were treated with 120 μM forskolin with 0.5 mM IBMX for 30 minutes and lysed. The absorbance readings at 450 nm are shown in the top figure, while the corresponding western blots using CREB (48H2) Rabbit mAb #9197 (left panel) or Phospho-CREB (Ser133) (1B6) Mouse mAb #9196 (right panel) are shown in the bottom figure.
    PathScan® Phospho-CREB (Ser133) Sandwich ELISA Kit: Image 2 Expand Image
    Figure 2. The relationship between the protein concentration of lysates from untreated and forskolin-treated SK-N-MC cells and the absorbance at 450 nm using the PathScan® Phospho-CREB (Ser133) Sandwich ELISA Kit is shown.