Revision 2

#7827Store at +4C

1 Kit

(Reagents for 4 x 96 well plates)

Species Cross Reactivity

H

UniProt ID:

#P06213

Entrez-Gene Id:

#3643

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Volume Cap Color Storage Temp
Phospho-Insulin Receptor β (Tyr1146) Rabbit Capture Antibody (100X) 69197 400 µl Pink +4C
Insulin Receptor β Detection Mouse mAb (100X) 38708 400 µl Blue +4C
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody (1000X) 16736 40 µl Yellow -20C

Please visit cellsignal.com for a complete listing of recommended companion products.

Description

CST's PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (Tyr1146) Sandwich ELISA Antibody Pair is offered as an economical alternative to our PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (Tyr1146) Sandwich ELISA Kit #7254. Capture and detection antibodies (100X stocks) and HRP-linked secondary antibody (1000X stock) are supplied. Sufficient reagents are supplied for 4 x 96 well ELISAs. The phospho-insulin receptor β (Tyr1146) capture antibody is coated on a 96 well microplate in PBS overnight. After blocking, cell lysates are added followed by an insulin receptor β detection antibody and anti-mouse IgG, HRP-linked antibody. HRP substrate, TMB, is added for color development. The magnitude of the absorbance for this developed color is proportional to the quantity of phospho-insulin receptor β (Tyr1146) protein.
Antibodies in kit are custom formulations specific to kit.

Reagents not supplied

Phosphate Buffered Saline (PBS-20X) #9808
Phosphate Buffered Saline with Tween-20 (PBST-20X) #9809
Cell Lysis Buffer (10X) #9803
TMB Substrate #7004
STOP Solution #7002
Blocking Buffer: 1X PBS/0.5% Tween-20, 1% BSA
96 Well Microplates**
Microplate Reader
** Antibody Pairs have been validated on Corning© 96 Well Clear Polystyrene High Bind Stripwell™ Microplates (#2592).

Notes: Antibody pairs have been optimized using recommended buffers, reagents, plates and the included protocol. Solutions should be made fresh daily.

Background

Type I insulin-like growth factor receptor (IGF-IR) is a transmembrane receptor tyrosine kinase that is widely expressed in many cell lines and cell types within fetal and postnatal tissues (1-3). Receptor autophosphorylation follows binding of the IGF-I and IGF-II ligands. Three tyrosine residues within the kinase domain (Tyr1131, Tyr1135, and Tyr1136) are the earliest major autophosphorylation sites (4). Phosphorylation of these three tyrosine residues is necessary for kinase activation (5,6). Insulin receptors (IRs) share significant structural and functional similarity with IGF-I receptors, including the presence of an equivalent tyrosine cluster (Tyr1146/1150/1151) within the kinase domain activation loop. Tyrosine autophosphorylation of IRs is one of the earliest cellular responses to insulin stimulation (7). Autophosphorylation begins with phosphorylation at Tyr1146 and either Tyr1150 or Tyr1151, while full kinase activation requires triple tyrosine phosphorylation (8).

  1. Adams, T.E. et al. (2000) Cell Mol Life Sci 57, 1050-93.
  2. Baserga, R. (2000) Oncogene 19, 5574-81.
  3. Scheidegger, K.J. et al. (2000) J Biol Chem 275, 38921-8.
  4. Hernández-Sánchez, C. et al. (1995) J Biol Chem 270, 29176-81.
  5. Lopaczynski, W. et al. (2000) Biochem Biophys Res Commun 279, 955-60.
  6. Baserga, R. (1999) Exp Cell Res 253, 1-6.
  7. White, M.F. et al. (1985) J Biol Chem 260, 9470-8.
  8. White, M.F. et al. (1988) J Biol Chem 263, 2969-80.

Background References

    Cross-Reactivity Key

    H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    PathScan is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    使用に関する制限

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    Revision 2
    #7827

    PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (Tyr1146) Sandwich ELISA Antibody Pair

    PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (Tyr1146) Sandwich ELISA Antibody Pair: Image 1 Expand Image
    The relationship between protein concentration of lysates from untreated and insulin-treated CHO-IR/IRS-1 cells and the absorbance at 450 nm using PathScan® Phospho-Insulin Receptor β (Tyr1146) Sandwich ELISA Antibody Pair is shown. After starvation, CHO-IR/IRS-1 cells (85% confluence) were treated with 100 nM insulin for 2 min at 37°C and then lysed.