Revision 3

#7084Store at +4C

1 Kit

(96 assays)

Species Cross Reactivity

H

UniProt ID:

#Q9UM73

Entrez-Gene Id:

#238

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Color Storage Temp
ALK Rabbit mAb Coated Microwells 19900 96 tests +4C
ALK Mouse Detection mAb 13993 1 ea Green (Lyophilized) +4C
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody (ELISA Formulated) 13304 1 ea Red (Lyophilized) +4C
Detection Antibody Diluent 13339 5.5 ml Green +4C
HRP Diluent 13515 5.5 ml Red +4C
Luminol/Enhancer Solution 84850 3 ml RT
Stable Peroxide Buffer 42552 3 ml RT
Sealing Tape 54503 2 ea +4C
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 25 ml +4C
ELISA Sample Diluent 11083 25 ml Blue +4C
Cell Lysis Buffer (10X) 9803 15 ml -20C

*The microwell plate is supplied as 12 8-well modules - Each module is designed to break apart for 8 tests.

Description

The PathScan® Total ALK Chemiluminescent Sandwich ELISA Kit is a solid phase sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) that detects endogenous levels of total ALK protein and EML4-ALK or NPM-ALK fusion proteins with a chemiluminescent readout. Chemiluminescence ELISAs often have a wider dynamic range and higher sensitivity than conventional chromogenic detection. This chemiluminescent ELISA, which is offered in low volume microplates, shows increased signal and sensitivity while using a smaller sample size. An ALK rabbit antibody has been coated onto the microwells. After incubation with cell lysates, ALK and ALK fusion proteins are captured by the coated antibody. Following extensive washing, an ALK mouse antibody is added to detect the captured ALK and ALK fusion proteins. Anti-mouse IgG, HRP-linked antibody is then used to recognize the bound detection antibody. Chemiluminescent reagent is added for signal development. The magnitude of magnitude of light emission, measured in relative light units (RLU) is proportional to the quantity of total ALK and ALK fusion proteins.

*Antibodies in this kit are custom formulations specific to kit.

Specificity/Sensitivity

PathScan® Total ALK Chemiluminescent Sandwich ELISA Kit #7084 detects endogenous levels of total ALK, EML4-ALK and NPM-ALK fusion proteins in human cells. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species.

Background

Anaplastic lymphoma kinase (ALK) is a tyrosine kinase receptor for pleiotrophin (PTN), a growth factor involved in embryonic brain development (1-3). In ALK-expressing cells, PTN induces phosphorylation of both ALK and the downstream effectors IRS-1, Shc, PLCγ, and PI3 kinase (1). ALK was originally discovered as a nucleophosmin (NPM)-ALK fusion protein produced by a translocation (4). Investigators have found that the NPM-ALK fusion protein is a constitutively active, oncogenic tyrosine kinase associated with anaplastic lymphoma (4). Research literature suggests that activation of PLCγ by NPM-ALK may be a crucial step for its mitogenic activity and involved in the pathogenesis of anaplastic lymphomas (5).
A distinct ALK oncogenic fusion protein involving ALK and echinoderm microtubule-associated protein like 4 (EML4) has been described in the research literature from a non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line, with corresponding fusion transcripts present in some cases of lung adenocarcinoma. The short, amino-terminal region of the microtubule-associated protein EML4 is fused to the kinase domain of ALK (6-8).

  1. Stoica, G.E. et al. (2001) J Biol Chem 276, 16772-9.
  2. Iwahara, T. et al. (1997) Oncogene 14, 439-49.
  3. Morris, S.W. et al. (1997) Oncogene 14, 2175-88.
  4. Morris, S.W. et al. (1994) Science 263, 1281-4.
  5. Bai, R.Y. et al. (1998) Mol Cell Biol 18, 6951-61.
  6. Rikova, K. et al. (2007) Cell 131, 1190-203.
  7. Takeuchi, K. et al. (2008) Clin Cancer Res 14, 6618-24.
  8. Soda, M. et al. (2007) Nature 448, 561-6.

Background References

    Cross-Reactivity Key

    H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    PathScan is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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