Revision 3

#3446Store at -20C

Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

90, 270

Source/Isotype:

Rat IgG2a

UniProt ID:

#Q9UM47

Entrez-Gene Id:

4854

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Notch3 (8G5) Rat mAb detects endogenous levels of total notch3 protein. It recognizes the full-length (270 kDa) and the extracellular truncated fragment containing a short extracellular region, the transmembrane domain and the intracellular region (90 kDa).

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a fusion protein corresponding to intracellular residues of notch3.

Background

Notch proteins (Notch1-4) are a family of transmembrane receptors that play important roles in development and the determination of cell fate (1). Mature Notch receptors are processed and assembled as heterodimeric proteins, with each dimer comprised of a large extracellular ligand-binding domain, a single-pass transmembrane domain, and a smaller cytoplasmic subunit (Notch intracellular domain, NICD) (2). Binding of Notch receptors to ligands of the Delta-Serrate-Lag2 (DSL) family triggers heterodimer dissociation, exposing the receptors to proteolytic cleavages; these result in release of the NICD, which translocates to the nucleus and activates transcription of downstream target genes (3,4).
Notch3 is a member of notch family that is processed in a similar way to notch1 (5). It is expressed primarily in arterial smooth muscle cells (SMC). Mutations altering the number of cysteine residues in the notch3 extracellular region are associated with cerebral autosomal dominant arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy (CADASIL), a hereditary angiopathy leading to strokes and dementia in adults (6-8). Recent studies indicate that notch3 is overexpressed in many types of cancers (9-11).

  1. Artavanis-Tsakonas, S. et al. (1999) Science 284, 770-6.
  2. Chan, Y.M. and Jan, Y.N. (1998) Cell 94, 423-6.
  3. Schroeter, E.H. et al. (1998) Nature 393, 382-6.
  4. Rand, M.D. et al. (2000) Mol Cell Biol 20, 1825-35.
  5. Baron, M. (2003) Semin Cell Dev Biol 14, 113-9.
  6. Kalimo, H. et al. (2002) Brain Pathol 12, 371-84.
  7. Karlström, H. et al. (2002) Proc Natl Acad Sci USA 99, 17119-24.
  8. Monet, M. et al. (2007) Hum Mol Genet 16, 982-92.
  9. Park, J.T. et al. (2006) Cancer Res 66, 6312-8.
  10. Gramantieri, L. et al. (2007) Liver Int 27, 997-1007.
  11. Yamaguchi, N. et al. (2008) Cancer Res 68, 1881-8.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 3
#3446

Notch3 (8G5) Rat mAb

Western Blotting Image 1: Notch3 (8G5) Rat mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from HBP-ALL and A204 cells using Notch3 (8G5) Rat mAb. Full-length (FL) and cleaved notch3 proteins are indicated.