Revision 5
Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IHC-P, IF-IC, FC-FP, FC-L

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

32, 40

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q07011

Entrez-Gene Id:

3604

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:50 - 1:200
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:250 - 1:1000
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:400 - 1:1600
Flow Cytometry (Live) 1:400 - 1:1600

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #58350.

Specificity / Sensitivity

4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total 4-1BB/CD137/TNFRSF9 protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a recombinant protein specific to the extracellular domain of human 4-1BB/CD137/TNFRSF9 protein.

Background

TNFRSF9 is a member of the tumor necrosis factor receptor superfamily (1,2). It is also called 4-1BB or CD137 (1, 2). 4-1BB/CD137/TNFRSF9 is expressed in activated CD4+ and CD8+ T cells, natural killer cells and dendritic cells (2-5). The ligand 4-1BBL/CD137L/TNFSF9 on antigen presenting cells binds to 4-1BB/CD137/TNFRSF9 and costimulates the activation of T cells (5). The binding of agonistic antibodies to 4-1BB/CD137/TNFRSF9 also leads to costimulation for T cell activation (5). Studies have shown the effectiveness of targeting 4-1BB/CD137/TNFRSF9 by its agonistic antibodies in cancer immunotherapy (6).

  1. Sun, Y. et al. (2002) Nat Med 8, 1405-13.
  2. Wilcox, R.A. et al. (2002) J Clin Invest 109, 651-9.
  3. Lin, W. et al. (2008) Blood 112, 699-707.
  4. Wilcox, R.A. et al. (2002) J Immunol 168, 4262-7.
  5. Melero, I. et al. (1997) Nat Med 3, 682-5.
  6. Yonezawa, A. et al. (2015) Clin Cancer Res 21, 3113-20.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) FC-L: Flow Cytometry (Live)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 5
#34594

4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from primary human CD8+ T cells, treated with anti-CD3 and anti-CD28 in the presence of human interleukin-2, and various cell lines using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb (upper) and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of 4-1BB/CD137/TNFRSF9 from HDLM-2 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as the secondary antibody.
Immunohistochemistry Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human colon carcinoma using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 2: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human non-Hodgkin's lymphoma using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 3: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded HDLM-2 cell pellet (left, positive) or HT-29 cell pellet (right, negative) using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb
Immunohistochemistry Image 4: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human thymus using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb.
Immunofluorescence Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of primary human CD8+ T cells treated with anti-CD3 and anti-CD28 in the presence of human interleukin-2 (left, positive) and HeLa cells (right, negative) using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb (green). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).
Flow Cytometry Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of human peripheral blood mononuclear cells (green), treated with anti-CD3 (10 μg/ml, 72h) and anti-CD28 (5 μg/ml, 72h), using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype control #3900 (dashed lines) co-stained with a CD8 antibody. Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 was used as a secondary antibody. Analysis was performed on CD8+ cells.
Flow Cytometry Image 2: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of Jurkat cells (blue) and HDLM-2 cells (green), using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 was used as a secondary antibody.