Revision 4
Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IHC-Bond, IHC-P, IF-F, IF-IC, FC-FP, FC-L

REACTIVITY:

M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

24-28, 40-50

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P20334

Entrez-Gene Id:

21942

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
IHC Leica Bond 1:100 - 1:400
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:200 - 1:800
Immunofluorescence (Frozen) 1:800 - 1:3200
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:800 - 1:3200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:100 - 1:400
Flow Cytometry (Live) 1:100 - 1:400

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier-free (BSA and azide free) version of this product see product #71948.

Specificity / Sensitivity

4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total 4-1BB/CD137/TNFRSF9 protein.

Species Reactivity:

Mouse

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with recombinant protein corresponding to the extracellular domain of mouse 4-1BB/CD137/TNFRSF9 protein.

Background

TNFRSF9 is a member of the tumor necrosis factor receptor superfamily (1,2). It is also called 4-1BB or CD137 (1, 2). 4-1BB/CD137/TNFRSF9 is expressed in activated CD4+ and CD8+ T cells, natural killer cells and dendritic cells (2-5). The ligand 4-1BBL/CD137L/TNFSF9 on antigen presenting cells binds to 4-1BB/CD137/TNFRSF9 and costimulates the activation of T cells (5). The binding of agonistic antibodies to 4-1BB/CD137/TNFRSF9 also leads to costimulation for T cell activation (5). Studies have shown the effectiveness of targeting 4-1BB/CD137/TNFRSF9 by its agonistic antibodies in cancer immunotherapy (6).

  1. Sun, Y. et al. (2002) Nat Med 8, 1405-13.
  2. Wilcox, R.A. et al. (2002) J Clin Invest 109, 651-9.
  3. Lin, W. et al. (2008) Blood 112, 699-707.
  4. Wilcox, R.A. et al. (2002) J Immunol 168, 4262-7.
  5. Melero, I. et al. (1997) Nat Med 3, 682-5.
  6. Yonezawa, A. et al. (2015) Clin Cancer Res 21, 3113-20.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IHC-Bond: IHC Leica Bond IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) IF-F: Immunofluorescence (Frozen) IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) FC-L: Flow Cytometry (Live)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

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Revision 4
#18798

4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from CTLL-2, EL4, and primary mouse CD8+ T cells, treated with anti-CD3 and anti-CD28 in the presence of mouse interleukin-2, using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb (upper) or β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Western Blotting Image 2: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from mouse placenta and mouse skeletal muscle using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Immunohistochemistry Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse small intestine using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb performed on the Leica® BOND Rx.
Immunohistochemistry Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded 293T cell pellet, control (left, negative), mouse 4-1BB/CD137/TBFRSF9-transfected (middle, positive), and CTLL-2 cell pellet (right, positive) using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 2: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded 4T1 metastatic tumor in mouse lung using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 3: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse thymus using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb (left) compared to concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (right).
Immunohistochemistry Image 4: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse placenta using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 5: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse spleen using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb.
Immunofluorescence Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of mouse placenta using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with Alexa Fluor® 647 Phalloidin #8940 (red). Samples were mounted in Prolong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).
Immunofluorescence Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of CTLL-2 cells (left, positive) and EL4 cells (right, negative) using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with Alexa Fluor® 647 Phalloidin (red) #8940. Blue = Hoechst 33342 #4082 (fluorescent DNA dye).
Flow Cytometry Image 1: 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of live EL4 cells (blue, negative) and CTLL-2 cells (green, positive) using 4-1BB/CD137/TNFRSF9 (E2J5H) XP® Rabbit mAb (solid lines) or a concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 was used as a secondary antibody.