Revision 3

#69758Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

100

Source/Isotype:

Mouse IgG1

UniProt ID:

#P12814

Entrez-Gene Id:

87

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:50 - 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb recognizes endogenous levels of total α-Actinin protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the amino terminus of human α-Actinin-1 protein.

Background

α-Actinin belongs to the spectrin family of cytoskeletal proteins. It was first recognized as an actin cross-linking protein, forming an antiparallel homodimer with an actin binding head at the amino terminus of each monomer. The α-actinin protein interacts with a large number of proteins involved in signaling to the cytoskeleton, including those involved in cellular adhesion, migration, and immune cell targeting (1). The interaction of α-actinin with intercellular adhesion molecule-5 (ICAM-5) helps to promote neurite outgrowth (2). In osteoblasts, interaction of α-actinin with integrins stabilizes focal adhesions and may protect cells from apoptosis (3). The cytoskeletal α-actinin isoforms 1 and 4 (ACTN1, ACTN4) are non-muscle proteins that are present in stress fibers, sites of adhesion and intercellular contacts, filopodia, and lamellipodia. The muscle isoforms 2 and 3 (ACTN2, ACTN3) localize to the Z-discs of striated muscle and to dense bodies and plaques in smooth muscle (1).

  1. Otey, C.A. and Carpen, O. (2004) Cell Motil Cytoskeleton 58, 104-11.
  2. Nyman-Huttunen, H. et al. (2006) J Cell Sci 119, 3057-66.
  3. Triplett, J.W. and Pavalko, F.M. (2006) Am J Physiol Cell Physiol 291, C909-21.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
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Revision 3
#69758

α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb

Western Blotting Image 1: α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb Expand Image
Western blot analyisis of extracts from various cell lines using α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb.
Immunoprecipitation Image 1: α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb Expand Image
Immunoprecipitation of α-Actinin from Jurkat cells. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415, and lane 3 is α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb. Western blot was performed using α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb. Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 was used as a secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of SNB-19 cells using α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb (green). Actin filaments were labeled with DyLight 554 Phalloidin #13054 (red). Samples were mounted in ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).