Revision 3

#14093Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

18

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q16548

Entrez-Gene Id:

597

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total A1/Bfl-1 protein. Proteins of unknown origin are detected at 50 and 130 kDa in some cell lines.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Gly29 of human A1/Bfl-1 protein.

Background

The Bcl-2-related protein A1 (Bfl-1, BCL2A1) is an anti-apoptotic member of the Bcl-2 family originally cloned from mouse bone marrow as a granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF)-inducible gene (1). Expression of A1/Bfl-1 is primarily restricted to hematopoietic cells, although it has been detected in some non-hematopoietic tissues including lung and in endothelial cells (1,2). A1/Bfl-1 protein is rapidly induced by NF-κB and is elevated in response to a variety of factors that stimulate this pathway, including TNF-α and IL-1β, CD40, phorbol ester, and LPS (2-4). As with other Bcl-2 family proteins, A1/Bfl-1 functions by binding and antagonizing pro-apoptotic members of the family (Bid, Bim), which inhibits release of mitochondrial cytochrome c (5). In contrast, research studies indicate that the enzyme calpain cleaves A1/Bfl-1 at specific sites within the amino-terminal region, creating pro-apoptotic, carboxy-terminal fragments that promote mitochondrial release of cytochrome c and apoptosis (6). Studies suggest a possible therapeutic strategy of targeting apoptosis through use of the specific A1/Bfl-1 cleavage fragments (7).

  1. Lin, E.Y. et al. (1993) J Immunol 151, 1979-88.
  2. Karsan, A. et al. (1996) Blood 87, 3089-96.
  3. Lee, H.H. et al. (1999) Proc Natl Acad Sci USA 96, 9136-41.
  4. Zong, W.X. et al. (1999) Genes Dev 13, 382-7.
  5. Werner, A.B. et al. (2002) J Biol Chem 277, 22781-8.
  6. Kucharczak, J.F. et al. (2005) Cell Death Differ 12, 1225-39.
  7. Valero, J.G. et al. (2012) PLoS One 7, e38620.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 3
#14093

A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, mock transfected (-) or transfected with a construct expressing full-length human A1/Bfl-1 protein (hA1/Bfl-1; +), using A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb.
Western Blotting Image 2: A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from U-937 and UACC-62 cells using A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb.
Immunoprecipitation Image 1: A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of A1/Bfl-1 from Mutz-3 cell extracts. Lane 1 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, lane 2 is 10% input, and lane 3 is A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb #14093. Western blot analysis was performed using A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb #14093. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as the secondary antibody.