Revision 1

#8355Store at -20C

 

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Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
ARP2 (D85D5) Rabbit mAb 5614 40 µl 44 kDa Rabbit IgG
ARP3 Antibody 4738 40 µl 47 kDa Rabbit 
N-WASP (30D10) Rabbit mAb 4848 40 µl 65 kDa Rabbit IgG
Diap1 Antibody 5486 40 µl 150 kDa Rabbit 
Diap2 Antibody 5474 40 µl 130 kDa Rabbit 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Actin Nucleation Antibody Sampler Kit provides an economical means to evaluate the presence and status of actin nucleation. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform four western blot experiments per primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Actin nucleation, the formation of new actin filaments from existing filaments, affects actin filament structure during cell motility, division, and intracellular trafficking. An important actin nucleation protein complex is the highly conserved ARP2/3 complex, consisting of ARP2, ARP3, and ARPC1-5. The ARP2/3 complex promotes branching of an existing actin filament and formation of a daughter filament following activation by nucleation-promoting factors, such as WASP/WAVE or cortactin (1). The formation of podosomes, small cellular projections that degrade the extracellular matrix, is enhanced by ARP2/3 complex action. ARP2/3 competes with caldesmon, an actin binding protein shown to negatively affect podosome formation (2). Along with N-WASP, the ARP2/3 complex regulates nuclear actin filament nucleation and controls actin polymerization during transcription (3).
Formins are a family of large multidomain actin nucleation/polymerization proteins characterized by their catalytic FH2 domains. The mammalian diaphanous-related formin (mDia/diap) subfamily, including mDia1/diap1, mDia2/diap3 and mDia3/diap2, are effectors of Rho family small GTPases. In response to Rho, mDia/diap proteins are involved in the regulation of multiple cell functions including cytoskeletal dynamics, migration, adhesion, polarity, and cell shape (reviewed in 4,5).
mDia1/diap1 is activated by GTP-bound Rho, leading to Rho-associated kinase (ROCK)-dependent stress fiber formation (6,7). Rho activation of mDia1 has also been shown to regulate serum response factor (SRF)-dependent transcription (8), and has been implicated in human cancer phenotypes such as ras-mediated transformation, metastasis, and invasion (reviewed in 9).
mDia3/diap2, activated by the Rho family small GTPase cdc42, regulates the attachment of microtubules to the kinetochore during mitosis in mammalian cells (10).
Rho-dependent activation of mDia2/diap3 is important in assembly of the contractile ring during cytokinesis (11,12).

  1. Goley, E.D. and Welch, M.D. (2006) Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 7, 713-726.
  2. Morita, T. et al. (2007) J. Biol. Chem. 282, 8454-8463.
  3. Yoo, Y. et al. (2007) J. Biol. Chem. 282, 7616-7623.
  4. Schönichen, A. and Geyer, M. (2010) Biochim Biophys Acta 1803, 152-63.
  5. Chesarone, M.A. et al. (2010) Nat Rev Mol Cell Biol 11, 62-74.
  6. Watanabe, N. et al. (1999) Nat Cell Biol 1, 136-43.
  7. Ishizaki, T. et al. (2001) Nat Cell Biol 3, 8-14.
  8. Copeland, J.W. and Treisman, R. (2002) Mol Biol Cell 13, 4088-99.
  9. Narumiya, S. et al. (2009) Cancer Metastasis Rev 28, 65-76.
  10. Yasuda, S. et al. (2004) Nature 428, 767-71.
  11. Watanabe, S. et al. (2010) Mol Biol Cell 21, 3193-204.
  12. Watanabe, S. et al. (2008) Mol Biol Cell 19, 2328-38.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    使用に関する制限

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    Revision 1
    #8355

    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit

    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from HeLa, Jurkat and COS cells using ARP3 Antibody.
    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from various cell types, using N-WASP (30D10) Rabbit mAb.
    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from various cell lines using Diap2 Antibody.
    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from various cell lines using Diap1 Antibody.
    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from various cell lines using ARP2 (D85D5) Rabbit mAb.
    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    After the primary antibody is bound to the target protein, a complex with HRP-linked secondary antibody is formed. The LumiGLO® is added and emits light during enzyme catalyzed decomposition.
    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    Immunoprecipitation of N-WASP from MCF-7 cells, using N-WASP (30D10) Rabbit mAb. Western blot was performed using the same antibody.
    Actin Nucleation Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    Immunoprecipitation of diap2 from HCT-15 cells using Diap2 Antibody. Western blot was performed using the same antibody.