Revision 1

#14090Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

10

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q9NYG5

Entrez-Gene Id:

51529

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total APC11 protein. This antibody does not cross-react with either RBX1 or RBX2.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a full-length human recombinant APC11 protein.

Background

Eukaryotic cell proliferation depends strictly upon the E3 ubiquitin ligase activity of the anaphase promoting complex/cyclosome (APC/C), whose main function is to trigger the transition of the cell cycle from metaphase to anaphase. The APC/C complex promotes the assembly of polyubiquitin chains on substrate proteins in order to target these proteins for degradation by the 26S proteasome (1,2). The vertebrate APC/C complex consists of as many as 15 subunits, including multiple scaffold proteins, two catalytic subunits (APC2, APC11), and a number of proteins responsible for substrate recognition (3). All E3 enzymes, including APC/C, utilize ubiquitin residues activated by E1 enzymes and transferred to E2 enzymes. Research studies indicate that APC/C interacts with the E2 enzymes UBE2S and UBE2C via the RING-finger domain-containing subunit APC11 (4-6). APC/C function relies on multiple cofactors, including an APC/C coactivator formed by the cell division control protein 20 homolog (CDC20) and Cdh1/FZR1. The CDC20/Cdh1 coactivator is responsible for recognition of APC/C substrates through interaction with specific D-box and KEN-box recognition elements within these substrates (7-9).
Anaphase-promoting complex subunit 11 (APC11) harbors a RING-H2 motif, which is characterized by a series of non-tandem His and Cys residues responsible for the coordination of zinc cations. At the primary amino acid level, APC11 displays sequence similarity to RING-box proteins RBX1 and RBX2, which are the RING-H2 motif-containing subunits of SCF ubiquitin ligase complexes (10). A heterodimer complex containing APC11 and the cullin-like subunit, APC2, forms the catalytic core of the APC/C and is critical for the APC/C to catalyze ubiquitin chain elongation (4,11).

  1. Qiao, X. et al. (2010) Cell Cycle 9, 3904-12.
  2. Harper, J.W. et al. (2002) Genes Dev 16, 2179-206.
  3. Chang, L. et al. (2014) Nature 513, 388-93.
  4. Carroll, C.W. and Morgan, D.O. (2002) Nat Cell Biol 4, 880-7.
  5. Gmachl, M. et al. (2000) Proc Natl Acad Sci U S A 97, 8973-8.
  6. Leverson, J.D. et al. (2000) Mol Biol Cell 11, 2315-25.
  7. Kraft, C. et al. (2005) Mol Cell 18, 543-53.
  8. Glotzer, M. et al. (1991) Nature 349, 132-8.
  9. Pfleger, C.M. and Kirschner, M.W. (2000) Genes Dev 14, 655-65.
  10. Chan, A.H. et al. (2001) J Cell Biochem 83, 249-58.
  11. Tang, Z. et al. (2001) Mol Biol Cell 12, 3839-51.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalSilence is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#14090

APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb.
Western Blotting Image 2: APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, transfected with 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) or SignalSilence® APC11 siRNA I #14100 (+), using APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). The APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb confirms silencing of APC11, while the GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb is used as a loading control.
Immunoprecipitation Image 1: APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of APC11 from 293T cell extracts using either Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (lane 2) or APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot analysis was performed using APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb.