Revision 1

#14820Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, ChIP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

280

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P46100

Entrez-Gene Id:

546

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP results, use 10 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Chromatin IP 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

ATRX (D1N2E) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total ATRX protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Leu1189 of human ATRX protein.

Background

α-thalassemia/mental retardation X-linked (ATRX) is a transcriptional regulator and helicase that belongs to the SNF2 family of chromatin remodeling proteins (1,2). Together with its binding partner death-associated protein 6 (Daxx), ATRX acts as histone chaperone to deposit histone variant H3.3 at repetitive DNA sequences such as telomeric, pericentric, and ribosomal gene repeats (3-6). ATRX is involved in many nuclear functions that ensure proper sister chromatid cohesion during mitosis and chromosome alignment during meiosis (7,8). The ATRX transcriptional regulator also plays a role in the maintenance of telomere integrity and the regulation of gene expression during mammalian development by influencing DNA methylation patterns at high DNA repeat sequences (9,10). Mutations in the corresponding ATRX gene results in ATR-X syndrome, an X-linked disorder characterized by intellectual disabilities, craniofacial abnormalities, and mild α-thalassemia (11,12). Research studies indicate that the loss of ATRX protein occurs in numerous cancers, including pancreatic neuroendocrine tumors (PanNETs) and pediatric glioblastoma, where telomere maintenance occurs independently of telomerase (13-16).

  1. Clynes, D. et al. (2013) Trends Biochem Sci 38, 461-6.
  2. Picketts, D.J. et al. (1996) Hum Mol Genet 5, 1899-907.
  3. Drané, P. et al. (2010) Genes Dev 24, 1253-65.
  4. Elsässer, S.J. et al. (2012) Nature 491, 560-5.
  5. Lewis, P.W. et al. (2010) Proc Natl Acad Sci U S A 107, 14075-80.
  6. Goldberg, A.D. et al. (2010) Cell 140, 678-91.
  7. Ritchie, K. et al. (2008) J Cell Biol 180, 315-24.
  8. De La Fuente, R. et al. (2004) Dev Biol 272, 1-14.
  9. Wong, L.H. et al. (2010) Genome Res 20, 351-60.
  10. Gibbons, R.J. et al. (2000) Nat Genet 24, 368-71.
  11. Gibbons, R.J. et al. (1995) Cell 80, 837-45.
  12. Gibbons, R.J. et al. (1995) Hum Mol Genet 4 Spec No, 1705-9.
  13. Heaphy, C.M. et al. (2011) Science 333, 425.
  14. Lovejoy, C.A. et al. (2012) PLoS Genet 8, e1002772.
  15. Schwartzentruber, J. et al. (2012) Nature 482, 226-31.
  16. Jiao, Y. et al. (2011) Science 331, 1199-203.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation ChIP: Chromatin IP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SimpleChIP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#14820

ATRX (D1N2E) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: ATRX (D1N2E) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using ATRX (D1N2E) Rabbit mAb (upper) and Nucleolin (D4C7O) Rabbit mAb #14574. As expected, the signal for ATRX is not present in the negative cell line U2OS.
Immunoprecipitation Image 1: ATRX (D1N2E) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of ATRX from 293T cell extracts using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (lane 2) or ATRX (D1N2E) Rabbit mAb (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot analysis was performed using ATRX (D1N2E) Rabbit mAb.
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: ATRX (D1N2E) Rabbit mAb Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from HeLa cells and either ATRX (D1N2E) Rabbit mAb or Normal Rabbit IgG #2729, using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using human 18s rDNA repeat primers, SimpleChIP® Human 28s rDNA Repeat Primers #14901, and SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.