Revision 1
Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IF-IC

REACTIVITY:

H M R Hm Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

65

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P16278

Entrez-Gene Id:

2720

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:400

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

β-Galactosidase (E2U2I) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total β-galactosidase protein. The antibody cross-reacts with a 40 kDa protein of unknown identity in some cell extracts.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Hamster, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Asp39 of human β-galactosidase protein.

Background

β-galactosidase (also known as β-gal) is an essential hydrolase enzyme that catalyzes the hydrolysis of galactose-containing carbohydrates into monosaccharides. Substrates of β-galactosides include lactose, various glycoproteins, ganglioside GM1, and lactosylceramides. β-galactosidase is used widely in molecular biology; for example, isolation of recombinant bacteria during molecular cloning utilizes α-complementation of the bacterial β-galactosidase gene (lacZ) in the presence of a β-gal substrate to identify recombinant clones (1). In cell biology, Senescence-Associated beta-galactosidase (SA-β-gal), defined as β-gal activity at pH 6.0, is a widely used marker of replicative senescence. While initially thought to derive from a unique isoform of β-galactosidase expressed specifically in senescent cells (2), SA-β-gal activity was subsequently shown to result from overexpression and accumulation of β-galactosidase in endogenous lysosomes, and is not specifically required for replicative senescence (3).

  1. Messing, J. et al. (1977) Proc Natl Acad Sci U S A 74, 3642-6.
  2. Dimri, G.P. et al. (1995) Proc Natl Acad Sci U S A 92, 9363-7.
  3. Lee, B.Y. et al. (2006) Aging Cell 5, 187-95.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#27198

β-Galactosidase (E2U2I) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: β-Galactosidase (E2U2I) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using β-Galactosidase (E2U2I) Rabbit mAb (upper) and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Immunofluorescence Image 1: β-Galactosidase (E2U2I) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of SK-BR-3 cells (left, high-expressing) or Daudi cells (right, low-expressing) using β-Galactosidase (E2U2I) Rabbit mAb (green) and β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700 (red). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).