Revision 4

#14058Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IHC-Bond, IHC-P

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

90

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q5ZPR3

Entrez-Gene Id:

80381

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
IHC Leica Bond 1:50 - 1:200
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:100 - 1:400

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #58798.

Specificity / Sensitivity

B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total B7-H3 protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Ala94 of human B7-H3 protein.

Background

B7 homolog 3 (B7-H3, CD276) is a member of the B7 family of cell surface ligands that regulate T cell activation and immune responses. B7-H3 protein contains two extracellular Ig-like V-type domains and two IgG-like C2-type domains, a transmembrane domain, and a short intracellular domain (1,2). Early research examining the biological process of B7-H3 suggested that B7-H3 is a positive regulator of T cell response (1). Subsequent research studies indicated that B7-H3 is a negative regulator of T cell response, and that the protein inhibits T cell proliferation (2,3). One possibility is that B7-H3 interacts with two distinct sets of receptors, resulting in seemingly opposite biological outcomes (2). B7-H3 is expressed by antigen presenting cells, activated T cells, and a few normal tissues, including placenta and prostate (1,4,5). Expression of B7-H3 is seen in several cancer types, including prostate, breast, colon, lung, and gastric cancers, and in endothelial cells from tumor associated vasculature (6-8).

  1. Chapoval, A.I. et al. (2001) Nat Immunol 2, 269-74.
  2. Leitner, J. et al. (2009) Eur J Immunol 39, 1754-64.
  3. Ling, V. et al. (2003) Genomics 82, 365-77.
  4. Petroff, M.G. et al. (2005) Am J Pathol 167, 465-73.
  5. Roth, T.J. et al. (2007) Cancer Res 67, 7893-900.
  6. Loo, D. et al. (2012) Clin Cancer Res 18, 3834-45.
  7. Seaman, S. et al. (2007) Cancer Cell 11, 539-54.
  8. Zang, X. et al. (2010) Mod Pathol 23, 1104-12.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IHC-Bond: IHC Leica Bond IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalStain is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 4
#14058

B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb (upper) and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Western Blotting Image 2: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from COS-7 cells, mock transfected (-) or transfected with constructs expressing Myc-tagged full-length human PD-L1, PD-L2, B7-H3, or B7-H4 protein (as indicated), using B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb (upper), Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278 (middle), and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Immunohistochemistry Image 1: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human non-small cell lung carcinoma using B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb performed on the Leica® BOND Rx.
Immunohistochemistry Image 1: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded lung carcinoma using B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 2: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded colon carcinoma using B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 3: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded ovarian carcinoma using B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb in the presence of control peptide (left) or antigen-specific peptide (right).
Immunohistochemistry Image 4: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded LNCaP (left) and NCI-H69 (right) cell pellets using B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 5: B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb Expand Image
Multiplex immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human ovarian carcinoma using B7-H3 (D9M2L) XP® rabbit mAb (red), PD-1 (D4W2J) XP® rabbit mAb #86163 (green), B7-H4 (D1M8I) XP® rabbit mAb (cyan), LAG3 (D2G4O) XP® rabbit mAb #15372 (magenta), TIM-3 (D5D5R) XP® rabbit mAb #45208 (yellow), and VISTA (D1L2G) XP® rabbit mAb #64953 (orange).