Revision 3

#9502Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, W-S

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

35, 37, 47

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P55211

Entrez-Gene Id:

842

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Simple Western™ 1:10 - 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Caspase-9 Antibody detects endogenous levels of full length caspase-9 (47 kDa) and large fragments of caspase-9. The antibody does not recognize other caspases.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding aspartic acid 315 of human caspase-9. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Caspase-9 (ICE-LAP6, Mch6) is an important member of the cysteine aspartic acid protease (caspase) family (1,2). Upon apoptotic stimulation, cytochrome c released from mitochondria associates with the 47 kDa procaspase-9/Apaf-1. Apaf-1 mediated activation of caspase-9 involves intrinsic proteolytic processing, resulting in cleavage at Asp315 and producing a p35 subunit. Another cleavage occurs at Asp330, producing a p37 subunit that can serve to amplify the apoptotic response (3-6). Cleaved caspase-9 further processes other caspase members, including caspase-3 and caspase-7, to initiate a caspase cascade, which leads to apoptosis (7-10).

  1. Duan, H. et al. (1996) J. Biol. Chem. 271, 16720-16724.
  2. Srinivasula, S. M. et al. (1996) J. Biol. Chem. 271, 27099-27106.
  3. Liu, X. et al. (1996) Cell 86, 147-157.
  4. Li, P. et al. (1997) Cell 91, 479-489.
  5. Zou, H. et al. (1999) J. Biol. Chem. 274, 11549-11556.
  6. Srinivasula, S.M. et al. (1998) Mol Cell 1, 949-57.
  7. Deveraux, Q. L. et al. (1998) EMBO J. 17, 2215-2223.
  8. Slee, E. A. et al. (1999) J. Cell Biol. 144, 281-292.
  9. Sun, X.M. et al. (1999) J Biol Chem 274, 5053-60.
  10. MacFarlane, M. et al. (1997) J. Cell Biol. 137, 469-479.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting W-S: Simple Western™

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#9502

Caspase-9 Antibody

Western Blotting Image 1: Caspase-9 Antibody Expand Image
Western blot analysis of HeLa cells, untreated, staurosporine-treated (1 µM) or cytochrome c-treated (0.25 mg/ml), and Jurkat cells, untreated or cytochrome c-treated, using Caspase-9 Antibody.
Western Blotting Image 1: Caspase-9 Antibody Expand Image
Simple Western™ analysis of lysates (1 mg/mL) from Jurkat cells treated with Cytochrome C using Caspase-9 Antibody #9502. The virtual lane view (left) shows the target band (as indicated) at 1:10 and 1:50 dilutions of primary antibody. The corresponding electropherogram view (right) plots chemiluminescence by molecular weight along the capillary at 1:10 (blue line) and 1:50 (green line) dilutions of primary antibody. This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12-230 kDa separation module.