Revision 3

#93518Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

55

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P01730

Entrez-Gene Id:

920

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:50 - 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

CD4 (D2E6M) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total CD4 protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Asn55 of human CD4 protein.

Background

Cluster of Differentiation 4 (CD4) is a glycoprotein composed of an amino-terminal extracellular domain (four domains: D1-D4 with Ig-like structures), a transmembrane part, and a short cytoplasmic tail. CD4 is expressed on the surface of T helper cells, regulatory T cells, monocytes, macrophages, and dendritic cells, and plays an important role in the development and activation of T cells. On T cells, CD4 is the co-receptor for the T cell receptor (TCR), and these two distinct structures recognize the Antigen–Major Histocompatibility Complex (MHC). Specifically, the D1 domain of CD4 interacts with the β2-domain of the MHC class II molecule. CD4 ensures specificity of the TCR–antigen interaction, prolongs the contact between the T cell and the antigen presenting cell, and recruits the tyrosine kinase Lck, which is essential for T cell activation (1).

  1. Zamoyska, R. (1994) Immunity 1, 243-6.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#93518

CD4 (D2E6M) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: CD4 (D2E6M) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various human cells and mouse tissue using CD4 (D2E6M) Rabbit mAb (upper) and GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). CD4+ T cells were purified from human blood and stimulated for 7 days using beads coated with CD3 and CD28 antibodies in the presence of Human Interleukin-2 (hIL-2) #8907 (6.7 ng/ml).
Immunoprecipitation Image 1: CD4 (D2E6M) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of CD4 protein from HuT 102 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is CD4 (D2E6M) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using CD4 (D2E6M) Rabbit mAb. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as the secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: CD4 (D2E6M) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HuT 102 cells (left, positive) or Ramos cells (right, negative) using CD4 (D2E6M) Rabbit mAb #93518 (green). Samples were mounted in ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).