Revision 6

#15094Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IHC-P

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

25-30 (membrane bound); 17 (soluble)

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P29965

Entrez-Gene Id:

959

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #73222.

Specificity / Sensitivity

CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total membrane bound and soluble CD40 ligand protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with recombinant protein specific to the extracellular domain of human CD40 ligand protein.

Background

CD40 ligand (CD40L), also known as CD154, TRAP, and gp39, is the ligand for the TNF receptor family member CD40 (1-6). CD40L is expressed either as a soluble cytokine or as a homotrimeric transmembrane protein. CD40L primarily expressed on the surface of T-cells, but has also been reported in blood platelets, mast cells, basophils, NK cells, and B-cells. It plays an important role in stimulating B-cell cell proliferation and survival and promotes immunoglobulin class switching and secretion of IgE (7). Signals generated by CD40 vary depending on cell type and include activation of MAPK pathways as well as NF-κB (8-11). Mutations within the CD40L gene are associated with X-linked hyper-IgM syndrome characterized by high serum levels of IgM and decreased levels of other isotypes (12). The CD40L/CD40 pathway is an important area of interest in the study of cancer, vascular diseases, and inflammatory disorders (13-15).

  1. Noelle, R.J. et al. (1992) Proc Natl Acad Sci USA 89, 6550-4.
  2. Graf, D. et al. (1992) Eur J Immunol 22, 3191-4.
  3. Armitage, R.J. et al. (1992) Nature 357, 80-2.
  4. Hollenbaugh, D. et al. (1992) EMBO J 11, 4313-21.
  5. Gauchat, J.F. et al. (1993) FEBS Lett 315, 259-66.
  6. Castle, B.E. et al. (1993) J Immunol 151, 1777-88.
  7. Spriggs, M.K. et al. (1992) J Exp Med 176, 1543-50.
  8. Li, Y.Y. et al. (1996) J Immunol 157, 1440-7.
  9. Pearson, L.L. et al. (2001) Int Immunol 13, 273-83.
  10. Berberich, I. et al. (1996) EMBO J 15, 92-101.
  11. Aruffo, A. et al. (1993) Cell 72, 291-300.
  12. Berberich, I. et al. (1994) J Immunol 153, 4357-66.
  13. Korniluk, A. et al. (2014) Tumour Biol 35, 9447-57.
  14. Hassan, G.S. et al. (2012) Immunobiology 217, 521-32.
  15. Zhang, B. et al. (2013) Immunol Lett 153, 58-61.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalStain is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 6
#15094

CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines and tissues using CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb (upper) and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Western Blotting Image 2: CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of indicated amounts of recombinant Human CD40 Ligand (hCD40L) #3583 using CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb.
Immunoprecipitation Image 1: CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of CD40 ligand from a HeLa cell lysate spiked with recombinant Human CD40 Ligand (hCD40L) #3583 (10 ng/ml) using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (lane 2) or CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot was performed using CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb.
Immunoprecipitation Image 2: CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of CD40 ligand from Jurkat cells using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (lane 2) or CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot was performed using CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb. A conformation specific secondary antibody was used to avoid reactivity with IgG heavy and light chains.
Immunohistochemistry Image 1: CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human T-cell non-Hodgkin lymphoma using CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 2: CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded Jurkat (left) and Raji (right) cell pellets using CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb.