Revision 4

#62133Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

IF-IC, FC-FP, FC-L

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

Source/Isotype:

Mouse IgG1

UniProt ID:

#P05362

Entrez-Gene Id:

3383

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:500
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:200 - 1:800
Flow Cytometry (Live) 1:200 - 1:800

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb recognizes endogenous levels of total CD54/ICAM-1 protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with SDS denatured, formalin fixed cultured COLO-38 human melanoma cells.

Background

Intercellular cell adhesion molecule-1 (CD54 or ICAM-1) is a cell surface glycoprotein that belongs to the immunoglobulin superfamily (IgSF) of adhesion molecules. CD54 is expressed at low levels in diverse cell types, and is induced by cytokines (TNF-α, interleukin-1) and bacterial lipopolysaccharide (1). Apical localization of CD54 on endothelial cells (or basolateral localization on epithelial cells) is a prerequisite for leukocyte trafficking through the endothelial (or epithelial) barrier (1). Apical expression of CD54 on epithelial cells mediates pathogen invasion as well as host defense, a pattern also observed in tumors (1). CD54 also functions as a co-stimulator on antigen presenting cells, binding to its receptor LFA-1 (leukocyte function-associated antigen-1) on the surface of T cells during antigen presentation (2). Cross-linking of CD54 or binding to its ligand triggers activation of Src family kinases and the Rho/ROCK pathway (3-7). Phosphorylation on Tyr485 of CD54 is required for its association with SHP-2 (5). SHP-2 seems essential for CD54-induced Src activation (7).

  1. Hopkins, A.M. et al. (2004) Adv Drug Deliv Rev 56, 763-78.
  2. Nishibori, M. et al. (2003) J Pharmacol Sci 92, 7-12.
  3. Holland, J. and Owens, T. (1997) J Biol Chem 272, 9108-12.
  4. Etienne, S. et al. (1998) J Immunol 161, 5755-61.
  5. Pluskota, E. et al. (2000) J Biol Chem 275, 30029-36.
  6. Muro, S. et al. (2003) J Cell Sci 116, 1599-609.
  7. Wang, Q. et al. (2003) J Biol Chem 278, 47731-43.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Applications Key

IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) FC-L: Flow Cytometry (Live)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 4
#62133

CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb

Immunofluorescence Image 1: CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of A549 cells, untreated (left, negative) or treated with hTNF-α #8902 (10 ng/mL, 6 hr; right, positive), using CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb (green). Blue = Hoechst 33342 #4082 (fluorescent DNA dye).
Flow Cytometry Image 1: CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of A549 cells, untreated (blue) or treated with hTNF-α #8902 (10 ng/ml, 6 hr; green), using CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb (solid lines) or concentration-matched Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 (dashed lines). Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 was used as a secondary antibody.
Flow Cytometry Image 2: CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of live Jurkat cells (blue, low-expressing) and Raji cells (green, high-expressing) using CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb (solid lines) or concentration-matched Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 (dashed lines). Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 was used as a secondary antibody.
Flow Cytometry Image 3: CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of fixed and permeabilized Jurkat cells (blue, low-expressing) and Raji cells (green, high-expressing) using CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb (solid lines) or concentration-matched Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 (dashed lines). Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 was used as a secondary antibody.