Revision 2

#9555Store at -20C

1 Kit

(3 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-cdc25C (Thr48) Antibody 9527 20 µl 75 kDa Rabbit 
Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb 4901 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
cdc25C (5H9) Rabbit mAb 4688 20 µl 60, 75 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The cdc25C Antibody Sampler Kit provides an economical means to investigate the entry of eukaryotic cells into mitosis. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two Western blots with each antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Cdc25 is a protein phosphatase responsible for dephosphorylating and activating cdc2, a crucial step in regulating the entry of all eukaryotic cells into mitosis (1). cdc25C is constitutively phosphorylated at Ser216 throughout interphase by c-TAK1, while phosphorylation at this site is DNA damage-dependent at the G2/M checkpoint (2). When phosphorylated at Ser216, cdc25C binds to members of the 14-3-3 family of proteins, sequestering cdc25C in the cytoplasm and thereby preventing premature mitosis (3). The checkpoint kinases Chk1 and Chk2 phosphorylate cdc25C at Ser216 in response to DNA damage (4,5).
Full activation of cdc25C involves phosphorylation at more than 12 different sites by cdc2/cyclin B and Polo-like kinase, and the activity of Pin1, a peptidyl-prolyl isomerase (PPI) (6,7). Pin1 contains a WW domain that binds phospho-Ser/Thr-Pro sites and a catalytic PPI region that induces a cis/trans isomerization on phospho-Ser/Thr-Pro bonds (8). Thr48 and Thr67 of cdc25C interact directly with the WW domain of Pin1 when these sites are phosphorylated (9). Thr48 phosphorylation also mediates binding to CKS/p13SUC1 (10).

  1. Jessus, C. and Ozon, R. (1995) Prog. Cell Cycle Res. 1, 215-228.
  2. Peng, C.Y. et al. (1997) Science 277, 1501-1505.
  3. Kumagai, A. and Dunphy, W.G. (1999) Genes Dev. 13, 1067-1072.
  4. Blasina, A. et al. (1999) Curr. Biol. 9, 1-10.
  5. Furnari, B. et al. (1999) Mol. Biol. Cell 10, 833-845.
  6. Izumi, T. and Maller, J.L. (1993) Mol Biol Cell 4, 1337-50.
  7. Stukenberg, P.T. and Kirschner, M.W. (2001) Mol Cell 7, 1071-83.
  8. Yaffe, M.B. et al. (1997) Science 278, 1957-60.
  9. Lu, P.J. et al. (1999) Science 283, 1325-8.
  10. Landrieu, I. et al. (2001) J Biol Chem 276, 1434-8.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    使用に関する制限

    法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

    研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

    Revision 2
    #9555

    cdc25C Antibody Sampler Kit

    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from HeLa, 293 and K562 cells, using cdc25C (5H9) Rabbit mAb.
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Western Blot analysis of HT29 cells, untreated, nocodazole-treated, and lambda phosphotase-treated, using Phospho-cdc25C (Ser216) antibody (upper), and cdc25C (5H9) Rabbit Mab, #4688, (lower).
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    After the primary antibody is bound to the target protein, a complex with HRP-linked secondary antibody is formed. The LumiGLO® is added and emits light during enzyme catalyzed decomposition.
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    Western Blot analysis of HT29 cell extracts untreated, nocodazole-treated and lambda phosphotase-treated using Phospho-cdc25C (Thr48) (upper), and cdc25C (5H9) Rabbit mAb, #4688 (lower).
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    Western blot analysis of HT29 cell extracts untreated, nocodazole-treated, and λ phosphotase-treated using Phospho-cdc25C (Thr48), #9527 (upper), and cdc25C (5H9) Rabbit mAb (lower).
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    Western blot analysis of GST-cdc25C, unphosphorylated or phosphorylated in vitro by Chk2, using Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb (upper) or cdc25C antibody #9522 (lower).
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human breast carcinoma, using Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb.
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human colon carcinoma, showing cytoplasmic localization, using Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb.
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human lung carcinoma, using Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb.
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human lung carcinoma, untreated (left) or lambda phosphatase-treated (right), using Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb.
    cdc25C Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human lymph node, using Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb in the presence of control peptide (left) or Phospho-cdc25C (Ser216) Blocking Peptide #1190 (right).