Revision 4

#12790Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IHC-P, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

30

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P11802

Entrez-Gene Id:

1019

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:400 - 1:1600
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:200 - 1:800
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:100 - 1:400

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #23972.

Specificity / Sensitivity

CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total CDK4 protein. In COS-7 cells, this antibody recognizes a 40 kDa background band of unknown origin. This antibody does not cross-react with CDK1, 2, or 6.

Species Reactivity:

Human, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the carboxy terminus of human CDK4 protein.

Background

Cyclin-dependent kinase activity is regulated by T-loop phosphorylation (Thr172 in the case of CDK4), by the abundance of their cyclin partners, and by association with CDK inhibitors of the Cip/Kip or INK family of proteins (1). The inactive ternary complex of CDK4/cyclin D and p27 Kip1/Cip1 requires extracellular mitogenic stimuli for the release and degradation of p27, which affects progression through the restriction point and pRb-dependent entry into S-phase (2). The active complex of CDK4/cyclin D targets the retinoblastoma protein for phosphorylation, allowing the release of E2F transcription factors that activate G1/S-phase gene expression (3). In HeLa cells, upon UV irradiation, upregulation of p16 INK4A association with CDK4/cyclin D3 leads to a G2 delay, implicating CDK4/cyclin D3 activity in progression through the G2-phase of the cell cycle (4).

  1. Hirai, H. et al. (1995) Mol Cell Biol 15, 2672-81.
  2. Sherr, C.J. (1996) Science 274, 1672-7.
  3. Lukas, J. et al. (1996) Mol Cell Biol 16, 6917-25.
  4. Gabrielli, B.G. et al. (1999) J Biol Chem 274, 13961-9.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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