Revision 1

#17395Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H M Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

53

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P49336

Entrez-Gene Id:

1024

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total CDK8 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Pro455 of human CDK8 protein.

Background

The mammalian Mediator Complex is a multi-subunit protein complex that couples specific transcriptional regulators to RNA polymerase II (Pol II) and the basal transcription machinery. Interactions between distinct Mediator subunits and transcription factors allow for specific gene regulation (reviewed in 1).
Mediator complex interactions control various biological processes, including insulin signaling (2), NF-κB-dependent signaling (3), stem cell pluripotency and self renewal (4,5), and proliferation of colon cancer cells (6,7).
CDK8/Cyclin C, along with Med12 and Med13, constitute a subcomplex within the Mediator Complex thought to act as a molecular switch, inhibiting Pol II recruitment and transcription initiation (8,9). Expression of CDK8 abrogates E2F-1-dependent inhibition of β-catenin activity in colon cancer cells (9). High levels of CDK8 coincide with high β-catenin-dependent transcription in colon cancer cells, and their proliferation can be inhibited by suppressing CDK8 expression (8).
CDK8 can phosphorylate Ser727 on STAT1, which reduces natural killer (NK) cell toxicity (10,11). As such, inhibitors are being pursued as potential therapeutics to enhance NK cell activity and combat a variety of cancer types (12,13).

  1. Malik, S. and Roeder, R.G. (2005) Trends Biochem Sci 30, 256-63.
  2. Wang, W. et al. (2009) Dev Cell 16, 764-71.
  3. van Essen, D. et al. (2009) PLoS Biol 7, e73.
  4. Tutter, A.V. et al. (2009) J Biol Chem 284, 3709-18.
  5. Varelas, X. et al. (2008) Nat Cell Biol 10, 837-48.
  6. Firestein, R. et al. (2008) Nature 455, 547-51.
  7. Morris, E.J. et al. (2008) Nature 455, 552-6.
  8. Knuesel, M.T. et al. (2009) Mol Cell Biol 29, 650-61.
  9. Knuesel, M.T. et al. (2009) Genes Dev 23, 439-51.
  10. Bancerek, J. et al. (2013) Immunity 38, 250-62.
  11. Putz, E.M. et al. (2013) Cell Rep 4, 437-44.
  12. Dale, T. et al. (2015) Nat Chem Biol 11, 973-80.
  13. Rzymski, T. et al. (2017) Oncotarget , .

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#17395

CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from HeLa, Raw 264.7, and COS-7 cell lines using CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb.
Immunoprecipitation Image 1: CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of CDK8 from HeLa cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb.

Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as a secondary antibody.