Revision 1

#5480Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

145

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q13111

Entrez-Gene Id:

10036

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

CHAF1A (D77D5) XP® Rabbit mAb detects endogenous levels of total CHAF1A protein.

Species Reactivity:

Human, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Pro303 of human CHAF1A protein.

Background

Chromatin assembly factor 1 (CAF-1) is a histone H3/H4 chaperone complex that functions in de novo assembly of nucleosomes during DNA replication and nucleotide excision repair (1). Nucleosome assembly is a two-step process, involving initial deposition of a histone H3/H4 tetramer onto DNA, followed by the deposition of a pair of histone H2A/H2B dimers (1). CAF-1 interacts with PCNA and localizes to DNA replication and DNA repair foci, where it functions to assemble newly synthesized histone H3/H4 tetramers onto replicating DNA (2-6). Assembly of histone H2A/H2B dimers requires additional assembly factors. The CAF-1 complex consists of three proteins: CHAF1A (p150), CHAF1B (p60) and RBAP48 (p48 or RBBP4). CHAF1A and CHAF1B proteins are specific for the CAF-1 complex, while RBAP48 is a component of multiple chromatin modifying complexes (1). CHAF1A and CHAF1B expression levels correlate with cellular proliferation and both proteins are significantly down-regulated in quiescent cells (7).

  1. Adams, C.R. and Kamakaka, R.T. (1999) Curr Opin Genet Dev 9, 185-90.
  2. Smith, S. and Stillman, B. (1989) Cell 58, 15-25.
  3. Smith, S. and Stillman, B. (1991) EMBO J 10, 971-80.
  4. Shibahara, K. and Stillman, B. (1999) Cell 96, 575-85.
  5. Moggs, J.G. et al. (2000) Mol Cell Biol 20, 1206-18.
  6. Gaillard, P.H. et al. (1996) Cell 86, 887-96.
  7. Polo, S.E. et al. (2004) Cancer Res 64, 2371-81.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#5480

CHAF1A (D77D5) XP® Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: CHAF1A (D77D5) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from HeLa, Jurkat, and COS-7 cell lines using CHAF1A (D77D5) XP® Rabbit mAb.
No image available
Immunofluorescence Image 1: CHAF1A (D77D5) XP® Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells using CHAF1A (D77D5) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with DY-554 phalloidin (red).