Revision 1
Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

70

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q6A037

Entrez-Gene Id:

80750

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Cleaved N4BP1 (Asp488) (E8X4W) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of N4BP1 protein only when cleaved at Asp488. A non-specific band has been observed at 62 kDa by Western Blot.

Species Reactivity:

Mouse

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Asp488 of mouse N4BP1 protein.

Background

N4BP1 (NEDD4-binding protein 1) was identified as a binding partner and substrate for the HECT domain-containing ubiquitin ligase NEDD4 (1). Subsequently, it was also found to interact with Itch, a ubiquitin ligase structurally similar to NEDD4 (2). Interaction between N4BP1 interferes with the ability of Itch to bind its substrates, including c-Jun and p63 (2). N4BP1 expression has been associated with immune regulation as well as cancer. N4BP1 was identified as an inhibitory factor of NF-κB-mediated MHC-1 expression in neuroblastoma and high expression of N4BP1 was linked to poor overall survival (3). Studies have also found that N4BP1 is a suppressor of cytokine production that can be cleaved and inactivated by caspase-8 (4). N4BP1 can interact with the NF-κB modulator NEMO to suppress NF-κB transcriptional activity (5). Studies have also identified N4BP1 as a potent interferon-inducible HIV-1 restriction factor that targets the degradation of viral mRNA (6).

  1. Murillas, R. et al. (2002) J Biol Chem 277, 2897-907.
  2. Oberst, A. et al. (2007) Proc Natl Acad Sci U S A 104, 11280-5.
  3. Spel, L. et al. (2018) Cancer Res 78, 6621-6631.
  4. Gitlin, A.D. et al. (2020) Nature 587, 275-280.
  5. Shi, H. et al. (2021) Nat Commun 12, 1379.
  6. Yamasoba, D. et al. (2019) Nat Microbiol 4, 1532-1544.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#37378

Cleaved N4BP1 (Asp488) (E8X4W) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Cleaved N4BP1 (Asp488) (E8X4W) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, mock transfected (-) or transfected with constructs expressing Myc/DDK-tagged full-length mouse N4BP1 (mN4BP1-Myc/DDK; +) or a Myc/DDK-tagged fragment of mouse N4BP1 expressing amino acids M1-D488 (Myc/DDK-mN4BP1(M1-D488); +), using Cleaved N4BP1 (Asp488) (E8X4W) Rabbit mAb (upper), Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278 (middle), or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Western Blotting Image 2: Cleaved N4BP1 (Asp488) (E8X4W) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from mouse bone marrow-derived macrophages (mBMDM), untreated (-) or treated with Lipopolysaccharides (LPS) #14011 (1 μg/mL, 48 hr; +), using Cleaved N4BP1 (Asp488) (E8X4W) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).