Revision 1

#97361Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

88

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P50416

Entrez-Gene Id:

1374

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:400 - 1:1600
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:200 - 1:800

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total CPT1A protein. This antibody does not cross-react with CPT1B, CPT1C, or CPT2.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Leu696 of human CPT1A protein.

Background

Carnitine palmitoyltransferase-1 (CPT1), localized to the mitochondrial outer membrane, translocates fatty acids across the mitochondrial membranes and catalyzes the rate-limiting step of β-oxidation (1,2). There are three isoforms of this enzyme: CPT1A (liver), CPT1B (muscle), and CPT1C (brain) (1,2). Deficiency of CPT1A results in an autosomal recessive mitochondrial fatty acid oxidation disorder (3). Studies have shown that physiological high blood glucose and insulin levels inhibit CPT1B activity in human muscle and therefore divert long-chain fatty acids toward storage in human muscle as triglycerides (4). Furthermore, mice deficient in CPT1C show less food intake and reduced body weight (5). These findings suggest that CPT1 may play a role in metabolic syndromes.

  1. Wolfgang, M.J. et al. (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103, 7282-7.
  2. Bonnefont, J.P. et al. Mol Aspects Med 25, 495-520.
  3. Ogawa, E. et al. (2002) J Hum Genet 47, 342-7.
  4. Rasmussen, B.B. et al. (2002) J Clin Invest 110, 1687-93.
  5. Wolfgang, M.J. and Lane, M.D. (2011) FEBS J 278, 552-8.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#97361

CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb (upper) and GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). The absence of detected CPT1A expression in SK-MEL-5 cell extracts is consistent with RNAseq expression profiling data, confirming specificity of the antibody for CPT1A.
Immunoprecipitation Image 1: CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of CPT1A protein from HeLa cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as the secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells (left, positive) or SK-MEL-5 cells (right, negative) using CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with DyLight 650 Phalloidin #12956 (red). Samples were mounted in ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).
Flow Cytometry Image 1: CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of SK-MEL-5 cells (blue, negative) and HeLa cells (green, positive) using CPT1A (E3Y1V) Rabbit mAb (solid lines) or a concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 was used as a secondary antibody.