Revision 3

#5933Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, W-S, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H M R Hm Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

22

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q99497

Entrez-Gene Id:

11315

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Simple Western™ 1:50 - 1:250
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total DJ-1 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Hamster, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Lys148 of human DJ-1 protein.

Background

Parkinson's disease (PD) is characterized by the presence of Lewy bodies (intracellular inclusions) and by the loss of dopaminergic neurons. Research studies have shown that mutations in α-synuclein, Parkin, and DJ-1 are linked to PD (1). α-synuclein is a major component of the aggregates found in Lewy bodies. Parkin is involved in protein degradation through the ubiquitin-proteasome pathway, and investigators have shown that mutations in Parkin cause early onset of PD (1). Loss-of-function mutations in DJ-1 cause early onset of PD, but DJ-1 is associated with multiple functions: it cooperates with Ras to increase cell transformation, it positively regulates transcription of the androgen receptor, and it may function as an indicator of oxidative stress (2-5). Dopamine D2 receptor-mediated functions are greatly impaired in DJ-1 (-/-) mice, resulting in reduced long-term depression (6).

  1. Borrelli, E. (2005) Neuron 45, 479-81.
  2. Bonifati, V. et al. (2003) Science 299, 256-9.
  3. Nagakubo, D. et al. (1997) Biochem. Biophys. Res. Commun. 231, 509-13.
  4. Takahashi, K. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 37556-63.
  5. Mitsumoto, A. and Nakagawa, Y. (2001) Free Radic. Res. 35, 885-93.
  6. Goldberg, M.S. et al. (2005) Neuron 45, 489-96.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting W-S: Simple Western™ IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#5933

DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from MEF wild-type, MEF DJ-1 (-/-), HeLa, and C6 cells using DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb (upper) and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower). (MEF wild-type and MEF DJ-1 (-/-) cells were kindly provided by Dr. Philipp Kahle, University of Tübingen, Germany).
Western Blotting Image 1: DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb Expand Image
Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from C6 cells using DJ-1 (D29E5) XP Rabbit mAb #5933. The virtual lane view (left) shows the target band (as indicated) at 1:50 and 1:250 dilutions of primary antibody. The corresponding electropherogram view (right) plots chemiluminescence by molecular weight along the capillary at 1:50 (blue line) and 1:250 (green line) dilutions of primary antibody. This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12-230 kDa separation module.
No image available
Immunofluorescence Image 1: DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of MEF wild-type (left) or MEF DJ-1 (-/-) (right) cells using DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with DY-554 phalloidin (red). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye). (MEF wild-type and MEF DJ-1 (-/-) cells were kindly provided by Dr. Philipp Kahle, University of Tübingen, Germany).