Revision 1

#4602Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

450

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P78527

Entrez-Gene Id:

5591

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

DNA-PKcs Antibody detects endogenous levels of DNA-PKcs protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to amino acids near the carboxy-terminus of human DNA-PKcs. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

DNA-dependent protein kinase (DNA-PK) is an important factor in the repair of double-stranded breaks in DNA. Cells lacking DNA-PK or in which DNA-PK is inhibited fail to show proper nonhomologous end-joining (NHEJ) (1-7). DNA-PK is composed of two DNA-binding subunits (Ku70 and Ku86) and one 450 kDa catalytic subunit (DNA-PKcs) (8). It is thought that a heterodimer of Ku70 and Ku86 binds to double-stranded DNA broken ends before DNA-PKcs binds and is activated (1,9). Activated DNA-PKcs is a serine/threonine kinase that has been shown to phosphorylate a number of proteins in vitro, including p53, transcription factors, RNA polymerase, and Ku70/Ku86 (10,11). DNA-PKcs autophosphorylation at multiple sites, including Thr2609 and Ser2056, results in an inactivation of DNA-PK kinase activity and NHEJ ability (12,13). It has been demonstrated, however, that DNA-PK preferentially phosphorylates substrates before it autophosphorylates, suggesting that DNA-PK autophosphorylation may play a role in disassembly of the DNA repair machinery (14,15). Autophosphorylation at Thr2609 has also been shown to be required for DNA-PK-mediated double-strand break repair, and phosphorylated DNA-PK co-localizes with H2A.X and 53BP1 at sites of DNA damage (16). Phosphorylation at Ser2056 occurs in response to double-stranded DNA breaks and ATM activation (17).

  1. Gottlieb, T.M. and Jackson, S.P. (1993) Cell 72, 131-42.
  2. Hartley, K.O. et al. (1995) Cell 82, 849-56.
  3. Rosenzweig, K.E. et al. (1997) Clin Cancer Res 3, 1149-56.
  4. Jackson, S.P. and Jeggo, P.A. (1995) Trends Biochem Sci 20, 412-5.
  5. Roth, D.B. et al. (1995) Curr Biol 5, 496-9.
  6. Baumann, P. and West, S.C. (1998) Proc Natl Acad Sci U S A 95, 14066-70.
  7. Chen, S. et al. (2001) J Biol Chem 276, 24323-30.
  8. Jeggo, P.A. (1997) Mutat Res 384, 1-14.
  9. Suwa, A. et al. (1994) Proc Natl Acad Sci U S A 91, 6904-8.
  10. Anderson, C.W. and Lees-Miller, S.P. (1992) Crit Rev Eukaryot Gene Expr 2, 283-314.
  11. Kuhn, A. et al. (1995) Genes Dev 9, 193-203.
  12. Chan, D.W. and Lees-Miller, S.P. (1996) J Biol Chem 271, 8936-41.
  13. Douglas, P. et al. (2002) Biochem. J. 368, 243-51.
  14. Lees-Miller, S.P. et al. (1992) Mol Cell Biol 12, 5041-9.
  15. Jackson, S.P. et al. (1990) Cell 63, 155-65.
  16. Chan, D.W. et al. (2002) Genes Dev 16, 2333-8.
  17. Yajima, H. et al. (2009) J Mol Biol 385, 800-10.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。