Revision 6
Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP, eCLIP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

97

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P78344

Entrez-Gene Id:

1982

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:100 - 1:200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:400
eCLIP 1:200
For more information about eCLIP and the RBP-eCLIP kit, please visit Eclipse Bioinnovations.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb detects endogenous levels of total eIF4G2/p97 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Leu450 of human eIF4G2/p97 protein.

Background

The initiation of translation is an important biological event and a variety of factors contribute to this process. Members of the eIF4 translation initiation factor family bind to the 5' m7 GTP mRNA cap and unwind the mRNA secondary structure (1,2). The amino-terminal portion of eIF4G physically associates with eIF4E to stimulate the binding of eIF4E to the mRNA cap structure (3). eIF4G also interacts with eIF3 and eIF4A and serves as an adaptor molecule in the eIF4 complex (4). Moreover, eIF4G plays a role in internal ribosomal entry site (IRES)-mediated initiation of translation (5,6). The eIF4G family includes eIF4G1 (eIF4GI), eIF4G2 (p97, DAP5 or NAT1), and eIF4G3 (eIF4GII) (7). These factors share a homologous sequence that provides for interaction with initiation factors eIF3 and eIF4A. Both eIF4G1 and eIF4G3 are involved in cap-dependent translation, while eIF4G2 plays a role in IRES-mediated translation of some genes during cell stress (7,8).

  1. Yan, R. and Rhoads, R.E. (1995) Genomics 26, 394-398.
  2. Morley, S.J. et al. (1997) RNA 3, 1085-1104.
  3. Haghighat, A. and Sonenberg, N. (1997) J. Biol. Chem. 272, 21677-21680.
  4. De Gregorio, E. et al. (1998) RNA 4, 828-836.
  5. Ohlmann, T. et al. (1996) EMBO J. 15, 1371-1382.
  6. Borman, A.M. and Kean, K.M. (1997) Virology 237, 129-136.
  7. Henis-Korenblit, S. et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99, 5400-5405.
  8. Nevins, T.A. et al. (2003) J. Biol. Chem. 278, 3572-3579.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) eCLIP: eCLIP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 6
#5169

eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell types using eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb.
No image available
Immunofluorescence Image 1: eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells using eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments have been labeled with DY-554 phalloidin (red). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).
Flow Cytometry Image 1: eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of HeLa cells using eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb (blue) compared to Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (red).
eCLIP Image 1: eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb Expand Image
Enhanced cross-linking and immunoprecipitation (eCLIP) was performed with RNA from K-562 cells and eIF4G2/p97 (D88B6) XP® Rabbit mAb using a protocol based on the RBP-eCLIP method from EclipseBio. The figure shows binding across the TGFB1 transcript. Data is kindly provided by the laboratory of Dr. Gene Yeo and used with permission.