Revision 1

#97558Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

53, 43, 30, 21

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P57764

Entrez-Gene Id:

79792

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total Gasdermin D protein. This antibody recognizes the 30 kDa amino terminal fragment produced during pyroptosis by caspase-1, a 43 kDa fragment produced by caspase-3, as well as a 21 kDa fragment produced by cleavage at both sites.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Trp130 of human Gasdermin D protein.

Background

Gasdermin D (GSDMD), a member of the gasdermin family that includes GSDMA, GSDMB, and GSDMC, has been reported to have a critical role as a downstream effector of pyroptosis (1,2). Pyroptosis is a lytic type of cell death triggered by inflammasomes, multiprotein complexes assembled in response to pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) or danger-associated molecular patterns (DAMPs) that result in the activation of caspase-1 and subsequent cleavage of pro-inflammatory cytokines IL-1β and IL-18 (3). Gasdermin D was identified by two independent groups as a substrate of inflammatory caspases, caspase-1 and caspase-11/4/5, producing two fragments: GSDMD-N and GSDMD-C. Cleavage results in release of an intramolecular inhibitory interaction between the N- and C-terminal domains, allowing the N-terminal fragment GSDMD-N to initiate pyroptosis through the formation of pores on the plasma membrane (4-7).

  1. Kayagaki, N. et al. (2015) Nature 526, 666-71.
  2. Shi, J. et al. (2015) Nature 526, 660-5.
  3. Broz, P. and Dixit, V.M. (2016) Nat Rev Immunol 16, 407-20.
  4. Aglietti, R.A. et al. (2016) Proc Natl Acad Sci U S A 113, 7858-63.
  5. Ding, J. et al. (2016) Nature 535, 111-6.
  6. Liu, X. et al. (2016) Nature 535, 153-8.
  7. Sborgi, L. et al. (2016) EMBO J 35, 1766-78.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
KARPAS cell line source: Dr. Abraham Karpas at the University of Cambridge.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#97558

Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from PC-3 cells and PC-3 GSDMD knockout (-/-) cells using Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Western Blotting Image 2: Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Western Blotting Image 3: Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from THP-1 cells, differentiated with TPA #4174 (50 ng/ml, overnight) and then treated with LPS #14011 (5 μg/ml, indicated times), using Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of Gasdermin D protein from THP-1 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as a secondary antibody.