Revision 4

#31929Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

55

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q99684

Entrez-Gene Id:

2672

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:800 - 1:3200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:800 - 1:1600

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total GFI1 protein. This antibody may detect a band of unknown identity at 40kDa.

Species Reactivity:

Human, Mouse

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with recombinant protein specific to the amino terminus of human GFI1 protein.

Background

GFI1 and its homolog GFI1b are transcriptional repressors and important regulators of hematopoiesis (1). GFI1/GFI1b negatively regulate transcription by recruiting chromatin regulatory proteins including CoREST, the histone demethylase LSD1, and HDACs 1 and 2, which associate with the GFI1 proteins via their N-terminal SNAG repression domains (2,3). GFI1 is expressed in hematopoietic stem cells (HSCs), where it is necessary to restrict HSC proliferation and maintain functional integrity (4,5). It is also expressed in common lymphoid and myeloid progenitors, where it plays an essential role in lymphoid and granulo-monocytic differentiation (5,6). Indeed, GFI1 knockout mice show impaired granulocytic differentiation and develop severe neutropenia, causing them to die quickly due to bacterial infection (7,8). In contrast, GFI1b is necessary for erythroid and megakaryocytic development and differentiation, and inactivation of GFI1b in mice leads to embryonic lethality (9). Unsurprisingly, the GFI1 proteins are implicated in multiple blood disorders, and GFI1 specifically is considered to be a predictor and therapeutic target for acute myeloid leukemia (AML)/myelodysplastic syndrome (MDS) (10). A GFI1 variant protein caused by a point mutation (S36N) may also confer a disposition to AML and accelerate disease progression (11,12). Interestingly, GFI1 has also been described to be an oncogenic driver for certain subsets of Group 3 medulloblastomas (13,14).

  1. Duan, Z. and Horwitz, M. (2003) Hematology 8, 339-44.
  2. Saleque, S. et al. (2007) Mol Cell 27, 562-72.
  3. Beauchemin, H. and Möröy, T. (2020) Front Genet 11, 591099.
  4. Hock, H. et al. (2004) Nature 431, 1002-7.
  5. Zeng, H. et al. (2004) EMBO J 23, 4116-25.
  6. Möröy, T. et al. (2015) Blood 126, 2561-9.
  7. Karsunky, H. et al. (2002) Nat Genet 30, 295-300.
  8. Person, R.E. et al. (2003) Nat Genet 34, 308-12.
  9. Saleque, S. et al. (2002) Genes Dev 16, 301-6.
  10. Hönes, J.M. et al. (2016) Leukemia 30, 1237-45.
  11. Khandanpour, C. et al. (2010) Blood 115, 2462-72.
  12. Botezatu, L. et al. (2016) Exp Hematol 44, 713-726.e14.
  13. Vo, B.T. et al. (2017) Cell Rep 18, 2907-2917.
  14. Lee, C. et al. (2019) Nat Commun 10, 332.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 4
#31929

GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb (upper) and GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). As expected, expression of GFI1 is low in T-47D cells based on mRNA expression and mass spectrometry profiling data.
Immunoprecipitation Image 1: GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of GFI1 protein from Jurkat, Clone E6-1 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as the secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HL-60 cells (left, positive) and T-47D cells (right, negative) using GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb (green) and DyLight️ 554 Phalloidin #13054 (red).
Flow Cytometry Image 1: GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of T-47D cells (blue) and THP-1 cells (green) using GFI1 (E5J6J) Rabbit mAb (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 was used as a secondary antibody.