Revision 1

#20292Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IHC-P, IF-IC

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

100

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P14625

Entrez-Gene Id:

7184

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:800
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total Grp94 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Leu397 of human Grp94 protein.

Background

Secretory proteins are synthesized on polysomes and translocated into the endoplasmic reticulum (ER). Inside ER, these proteins are often modified by disulfide bond formation, amino-linked glycosylation and folding. The ER contains a pool of molecular chaperones, including Grp94, to help ensure correct protein folding. Grp94 is a glucose-regulated protein (1) with sequence homology to Hsp90 (2). In addition to its role in helping to facilitate folding of a number of secretory proteins to their correct conformation (3), studies suggest that Grp94 derived from cancer cells also induces anti-tumor immune responses in mouse tumor models (4, 5). One way in which Grp94 promotes tumor immunogenicity is its ability to bind to and present tumor-derived peptides as antigens (6). Furthermore, Grp94 has also been shown to induce maturation of dendritic cells (7). Taken together, Grp94 functions both as a tumor-specific antigen and as an activator of antigen-presenting cells to elicit an anti-cancer immune response (8).

  1. Lee, A.S. et al. (1981) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78, 4922-4925.
  2. Sorger, P.K. and Pelham, H.R. (1987) J. Mol. Biol. 194, 341-344.
  3. Argon, Y. and Simen, B.B. (1999) Semin. Cell Dev. Biol. 10, 495-505.
  4. Blachere, N.E. et al. (1997) J. Exp. Med. 186, 1315-1322.
  5. Tamura, Y. et al. (1997) Science 278, 117-120.
  6. Schild, H. and Rammensee, H.G. (2000) Nat. Immunol. 1, 100-101.
  7. Singh-Jasuja, H. et al. (2000) Eur. J. Immunol. 30, 2211-2215.
  8. Nicchitta, C.V. et al. (2004) Cell Stress Chaperones 9, 325-331.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalStain is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#20292

Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 1: Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human colon carcinoma using Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 2: Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human lung carcinoma using Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 3: Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human prostate carcinoma using Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb in the presence of control peptide (left) or antigen-specific peptide (right).
Immunofluorescence Image 1: Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa (left) and MCF7 (right) cells using Grp94 (D6X2Q) XP® Rabbit mAb (green). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).