Revision 1

#29881Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

145, 130

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P25092

Entrez-Gene Id:

2984

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:50 - 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total GUCY2C protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the carboxy terminus of human GUCY2C protein.

Background

Guanylyl cyclase C (GUCY2C) is a type I transmembrane glycoprotein whose expression in normal tissue is largely restricted to the apical membranes of polarized epithelial cells of the intestine (1,2). The guanylyl cyclase activity within the intracellular domain of GUCY2C is activated by binding exogenous bacterial enterotoxins and the endogenous peptide hormone agonists, guanylin and uroguanylin, which facilitates production of the second messenger cGMP (3-5). GUCY2C signaling plays a critical role in regulating the metabolism, proliferation, and differentiation of intestinal epithelial cells. These processes are critical for epithelial barrier renewal, water, and ion balance (6-8). Research studies have shown that the GUCY2C signaling axis functions to suppress intestinal tumorigenesis, in part, by restraining AKT activity (9,10). Lesions in the GUCY2C signaling axis that frequently contribute to cellular transformation are associated with a loss of expression of its endogenous ligands, which promotes a compensatory increase in GUCY2C expression. Indeed, GUCY2C expression is maintained in a high percentage of primary and metastatic human colorectal tumors, which has raised interest in therapeutically targeting this receptor (11,12).

  1. Valentino, M.A. et al. (2011) J Clin Invest 121, 3578-88.
  2. Kim, G.W. et al. (2013) Trends Endocrinol Metab 24, 165-73.
  3. Currie, M.G. et al. (1992) Proc Natl Acad Sci U S A 89, 947-51.
  4. Kita, T. et al. (1994) Am J Physiol 266, F342-8.
  5. Schulz, S. et al. (1990) Cell 63, 941-8.
  6. Li, P. et al. (2007) Am J Pathol 171, 1847-58.
  7. Li, P. et al. (2007) Gastroenterology 133, 599-607.
  8. Pitari, G.M. et al. (2001) Proc Natl Acad Sci U S A 98, 7846-51.
  9. Lin, J.E. et al. (2010) Gastroenterology 138, 241-54.
  10. Gibbons, A.V. et al. (2013) Cancer Res 73, 6654-66.
  11. Mathur, D. et al. (2020) Clin Cancer Res 26, 2188-2202.
  12. Magee, M.S. et al. (2018) Cancer Immunol Res 6, 509-516.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#29881

GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from T84, HT55, and HCT 116 cells using GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb (upper) or β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower). Negative expression of GUCY2C protein in HCT 116 cells is consistent with published observations.
Western Blotting Image 2: GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from T84 cells, untreated (-) or treated with PNGase F (+), using GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb (upper) or β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of GUCY2C protein from T84 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as a secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of T84 cells (left, positive) and HCT 116 cells (right, negative) using GUCY2C (E1Q6S) Rabbit mAb (green) and DAPI #4083 (blue).