Revision 5

#50722Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, ChIP, ChIP-seq

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

14

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P0C0S5

Entrez-Gene Id:

3015

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP and ChIP-seq results, use 10 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.
Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Chromatin IP 1:50
Chromatin IP-seq 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

H2A.Z (E9M5G) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total H2A.Z protein. This antibody does not cross-react with H2A protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Val110 of human H2A.Z protein.

Background

Modulation of chromatin structure plays a critical role in the regulation of transcription in eukaryotes. The nucleosome, made up of four core histone proteins (H2A, H2B, H3 and H4), is the primary building block of chromatin. In addition to the growing number of post-translational histone modifications regulating chromatin structure, cells can also exchange canonical histones with variant histones that can directly or indirectly modulate chromatin structure (1). There are five major variants of histone H2A: canonical H2A (most abundant), H2A.X, MacroH2A, H2ABbd and H2A.Z (2). Histone H2A.Z, the most conserved variant across species, functions as both a positive and negative regulator of transcription and is important for chromosome stability (2). Several homologous protein complexes, such as SWR-C (S. cerevisiae), TIP60 (D. melanogaster) and SRCAP (mammals), have been shown to catalyze the ATP-dependent exchange of H2A.Z for H2A in the nucleosome (3,4,5). This exchange of histone H2A variants changes histone-histone interactions in the nucleosome core and alters an acidic patch on the surface of the nucleosome, resulting in changes in nucleosome stability and binding of non-histone proteins such as HP1α (6,7).

  1. Jin, J. et al. (2005) Trends Biochem Sci 30, 680-7.
  2. Raisner, R.M. and Madhani, H.D. (2006) Curr Opin Genet Dev 16, 119-24.
  3. Mizuguchi, G. et al. (2004) Science 303, 343-8.
  4. Kusch, T. et al. (2004) Science 306, 2084-7.
  5. Ruhl, D.D. et al. (2006) Biochemistry 45, 5671-7.
  6. Suto, R.K. et al. (2000) Nat Struct Biol 7, 1121-4.
  7. Fan, J.Y. et al. (2004) Mol Cell 16, 655-61.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting ChIP: Chromatin IP ChIP-seq: Chromatin IP-seq

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SimpleChIP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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