Revision 1

#12604Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

60

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#O94992

Entrez-Gene Id:

10614

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:1200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:1600

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total HEXIM1 protein.

Species Reactivity:

Human, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Gly63 of human HEXIM1 protein.

Background

Hexamethylene bis-acetamide-inducible protein 1 (HEXIM1) was originally identified in vascular smooth muscle cells as a protein that is upregulated upon treatment with the differentiating agent hexamethylene bisacetamide (1). HEXIM1 binds 7SK RNA, a highly abundant non-coding RNA, and together they act as a potent inhibitor of positive transcription elongation factor b (P-TEFb) (2,3). P-TEFb phosphorylates the C-terminal domain of the largest subunit of RNA polymerase II and is an important regulator of transcription elongation (4-8). 7SK RNA-bound HEXIM1 interacts with the cyclin T1 subunit of P-TEFb, sequestering P-TEFb in an inactive form leading to transcription inhibition (2,3). The regulation of the relative ratio of inactive to active P-TEFb in the cell by HEXIM1/7SK RNA is thought to play a critical role in regulation of a wide range of cellular gene expression programs such as estrogen and glucocorticoid receptor regulated genes (9-12).

  1. Ouchida, R. et al. (2003) Genes Cells 8, 95-107.
  2. Michels, A.A. et al. (2004) EMBO J 23, 2608-19.
  3. Yik, J.H. et al. (2003) Mol Cell 12, 971-82.
  4. Buratowski, S. (2009) Mol Cell 36, 541-6.
  5. Lenasi, T. and Barboric, M. RNA Biol 7, 145-50.
  6. Pirngruber, J. et al. (2009) Cell Cycle 8, 3636-42.
  7. Wada, T. et al. (1998) EMBO J 17, 7395-403.
  8. Yamada, T. et al. (2006) Mol Cell 21, 227-37.
  9. Peterlin, B.M. et al. (2012) Wiley Interdiscip Rev RNA 3, 92-103.
  10. Ketchart, W. et al. (2011) Oncogene 30, 3563-9.
  11. Ogba, N. et al. (2008) Cancer Res 68, 7015-24.
  12. Shimizu, N. et al. (2005) Proc Natl Acad Sci U S A 102, 8555-60.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#12604

HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb
Immunoprecipitation Image 1: HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of HEXIM1 from HeLa cell extracts, using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (lane 2) or HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot analysis was performed using HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb.
Immunofluorescence Image 1: HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells using HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with DY-554 phalloidin (red).
Flow Cytometry Image 1: HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of Jurkat cells, untreated (blue) or treated with JQ1 (500nM, 72 hours; green), using HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb. Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) was used as a secondary antibody.