Revision 3

#71565Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

120

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q99814

Entrez-Gene Id:

2034

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:100 - 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total HIF-2α protein. This antibody does not cross-react with HIF-1α protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Glu600 of human HIF-2α protein.

Background

Hypoxia-inducible factor (HIF) is essential for the cellular response to hypoxia (1,2). Under normoxia conditions, the α subunit of HIF is ubiquitinated by von Hippel-Lindau (VHL) protein and is degraded in the ubiquitin/proteasome pathway (1,2). Hypoxia inhibits degradation of the α subunit, which leads to its stabilization (1,2). HIF, in turn, regulates the transcription of a variety of genes that respond to hypoxia conditions (1,2). There are several isoforms of the HIF α subunit (2). Studies have found that HIF-1α and HIF-2α expression is increased in some human cancers (2). HIF-1α has both pro- and anti-proliferative activities, whereas HIF-2α does not possess anti-proliferative activity (2). Therefore, HIF-2α likely plays an important role in tumorigenesis (2,3).

  1. Kaelin, W.G. (2005) Biochem Biophys Res Commun 338, 627-38.
  2. Toschi, A. et al. (2008) J Biol Chem 283, 34495-9.
  3. Gordan, J.D. and Simon, M.C. (2007) Curr Opin Genet Dev 17, 71-7.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#71565

HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of Hep G2 cells, vehicle-treated (-) or treated with cobalt chloride (CoCl2, 500 μM, 18 hr; +), using HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Western Blotting Image 2: HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of Hep G2 cells, vehicle-treated (-) or treated with cobalt chloride (CoCl2, 0.1 mM, 4 hr; +), untreated 786-O and A-498 cells using HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of HIF-2α protein from 786-O cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as the secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of Hep G2 cells, vehicle-treated (left) or treated with cobalt chloride (500 μM, 18 hr; right), using HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb (green), DyLight 554 Phalloidin #13054 (red), and DAPI #4083 (blue).