Revision 1

#16416Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

30

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#O60921

Entrez-Gene Id:

3364

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total HUS1 protein. In some cell lysates, this antibody detects a 45 kDa band of unknown origin.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Gln147 of human HUS1 protein.

Background

DNA damage resulting from genotoxic stress activates cellular checkpoints that prevent or delay cell division until damaged DNA is repaired or the cell follows an apoptotic pathway. The Rad9 homolog A (Rad9A, Rad9) protein is part of a checkpoint protein complex that acts as an early sensor of DNA damage. Together with the HUS1 and Rad1 checkpoint proteins, Rad9 forms a heterotrimeric 9-1-1 complex with a ring structure similar to the processivity factor PCNA. The 9-1-1 complex induces multiple signaling pathways, including the ATM- and ATR-activated DNA repair pathways (1,2). A functional 9-1-1 complex is required for ATR-dependent S phase checkpoint signaling (3).

The 9-1-1 complex interacts with DNA topoisomerase 2-binding protein 1 (TopBP1) in response to DNA damage, activating ATR and causing signal amplification through further recruitment of TopBP1 (4). The 9-1-1 complex interacts with DNA mismatch repair proteins MSH2, MSH3, and MSH6 to play a role in mismatch repair (5). During an error-free DNA damage tolerance process, the 9-1-1 complex cooperates with polyubiquitinated PCNA and Exo1 nuclease to support switching of the replicative polymerase to the undamaged template (6).

  1. Broustas, C.G. and Lieberman, H.B. (2012) J Cell Biochem 113, 742-51.
  2. Kai, M. (2013) Biomolecules 3, 75-84.
  3. Bao, S. et al. (2004) Oncogene 23, 5586-93.
  4. Ohashi, E. et al. (2014) DNA Repair (Amst) 21, 1-11.
  5. Bai, H. et al. (2010) DNA Repair (Amst) 9, 478-87.
  6. Karras, G.I. et al. (2013) Mol Cell 49, 536-46.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#16416

HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb.
Immunoprecipitation Image 1: HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of HUS1 from MCF7 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 was used as a secondary antibody.