Revision 1

#8137Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

46

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#O75874

Entrez-Gene Id:

3417

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:400
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

IDH1 (D2H1) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total IDH1 protein. This antibody does not recognize endogenous IDH2 protein, but does recognize IDH2 when recombinantly overexpresssed.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Arg222 of human IDH1 protein.

Background

IDH1 is one of three isocitrate dehydrogenases that catalyze the oxidative decarboxylation of isocitrate to α-ketoglutarate (α-KG). These enzymes exist in two distinct subclasses that utilize either NAD or NADP+ respectively, as an electron acceptor (1). IDH1 is the NADP+-dependent isocitrate dehydrogenase found in the cytoplasm and peroxisomes. IDH2 and 3 are mitochondrial enzymes that also function in the Krebs cycle. IDH1 is inactivated by phosphorylation at Ser113 and contains a clasp-like domain wherein both polypeptide chains in the dimer interlock (2,3). IDH1 is expressed in a wide range of species and also in organisms that lack a complete citric acid cycle. Mutations in IDH1 have been reported in glioblastoma (4), acute myeloid leukemia (5,6), and other malignancies (7). IDH1 appears to function as a tumor suppressor that, when mutationally inactivated, contributes to tumorigenesis in part through induction of the HIF-1 pathway (8).

  1. Ramachandran, N. and Colman, R.F. (1980) J Biol Chem 255, 8859-64.
  2. Bennett, P.M. and Holms, W.H. (1975) J Gen Microbiol 87, 37-51.
  3. Hurley, J.H. et al. (1990) Science 249, 1012-6.
  4. Bleeker, F.E. et al. (2009) Hum Mutat 30, 7-11.
  5. Abbas, S. et al. (2010) Blood 116, 2122-6.
  6. Paschka, P. et al. (2010) J Clin Oncol 28, 3636-43.
  7. Watanabe, T. et al. (2009) Am J Pathol 174, 1149-53.
  8. Zhao, S. et al. (2009) Science 324, 261-5.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#8137

IDH1 (D2H1) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: IDH1 (D2H1) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using IDH1 (D2H1) Rabbit mAb.
No image available
Immunofluorescence Image 1: IDH1 (D2H1) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of 293T cells using IDH1 (D2H1) Rabbit mAb (green). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).
Flow Cytometry Image 1: IDH1 (D2H1) Rabbit mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of HeLa cells using IDH1 (D2H1) Rabbit mAb (blue) compared to concentration-matched Rabbit

(DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (red).