Revision 3

#20609Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

130

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P35228

Entrez-Gene Id:

4843

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:800 - 1:1600

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

iNOS (E3W6B) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total iNOS protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the carboxy terminus of human iNOS protein.

Background

Nitric Oxide Synthase (NOS) catalyzes the formation of nitric oxide (NO) and citrulline from L-arginine, oxygen, and cofactors. Three family members have been characterized: neuronal NOS (nNOS), which is found primarily in neuronal tissue; inducible NOS (iNOS), which is induced by interferon gamma and lipopolysaccharides in the kidney and cardiovascular system; and endothelial NOS (eNOS), which is expressed in blood vessels (1). NO is a messenger molecule with diverse functions throughout the body, including the maintenance of vascular integrity, homeostasis, synaptic plasticity, long-term potentiation, learning, and memory (2,3).

NO catalyzed by iNOS is involved in host defense against protozoa, bacteria, fungi, and viruses. Unlike constitutively expressed eNOS and nNos, iNOS is not usually expressed in quiescent cells. iNOS is transcriptionally induced in response to bacterial endotoxins, such as LPS and proinflammatory cytokines, in macrophages and various other cell types. Transcription factors involved in iNOS transcription include NF-κB, AP-1, and STAT. Different signaling pathways either promote (Jak1/2, PKC, c-Raf, p38 MAP kinase, and p44/42 MAP kinase) or inhibit (PI3 kinase) iNOS expression depending on stimulus and cell type (4).

  1. Tsutsui, M. (2004) J Atheroscler Thromb 11, 41-8.
  2. Son, H. et al. (1996) Cell 87, 1015-23.
  3. Hawkins, R.D. (1996) Neuron 16, 465-7.
  4. Bogdan, C. (2001) Nat Immunol 2, 907-16.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

Revision 3
#20609

iNOS (E3W6B) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: iNOS (E3W6B) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from DLD-1 cells, untreated (-) or treated with Human Interferon-γ (hIFN-γ) #80385 (100 U/mL), Human Interleukin-1β (hIL-1β) #8900 (50 U/mL), and Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 (10 ng/mL) for 24 hr (+), using iNOS (E3W6B) Rabbit mAb (upper) and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: iNOS (E3W6B) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of iNOS protein from DLD-1 cell extracts treated with Human Interferon-γ (hIFN-γ) #80385 (100 U/mL), Human Interleukin-1β (hIL-1β) #8900 (50 U/mL), and Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 (10 ng/mL) for 24 hr. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is iNOS (E3W6B) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using iNOS (E3W6B) Rabbit mAb. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as a secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: iNOS (E3W6B) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of DLD-1 cells, untreated (left, negative) or treated with a cocktail of Human Interferon-γ (hIFN-γ) #80385 (100 U/mL, 24 hr), Human Interleukin-1β (hIL-1β) #8900 (50 U/mL, 24 hr), and Recombinant Human TNF-α (10 ng/mL, 24 hr) (right, positive), using iNOS (E3W6B) Rabbit mAb (green). Samples were mounted in ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).