Revision 1

#96006Store at -20C

Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H M R

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

46

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#Q13572

Entrez-Gene Id:

3705

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

ITPK1 Antibody recognizes endogenous levels of total ITPK1 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Ala382 of human ITPK1 protein. Antibodies are purified by peptide affinity chromatography.

Background

Inositol phosphates (IPs) are key second messengers produced from receptor activated phospholipase c (PLC) isoforms as well as a family of inositol kinases including ITPK1, IPMK, IPK1, IP3K, IP6K, and VIP1 (1,2). Lipid-derived inositol 1,3,4-trisphosphate (Ins(1,3,4)P3) produced from PLC is a well known regulator of calcium signaling. Cytosolic Ins(1,3,4)P3 is further modified to higher order IPs and pyrophosphates with roles in numerous physiological processes, including energy metabolism, ion channel regulation, transcriptional regulation, and cell death.ITPK1 (inositol 1,3,4-trisphosphate 5/6-kinase) is a reversible, poly-specific IP kinase that phosphorylates Ins(1,3,4)P3 with potential physiological implications including acting as a modifier of cystic fibrosis (3,4). ITPK1 can add either a 5- or 6-phosphate to Ins(1,3,4)P3, add a 1-phosphate to Ins(3,4,5,6)P4, or dephosphorylate Ins(1,3,4,5,6)P5 to Ins(3,4,5,6)P4 (5,6). ITPK1 inhibits TNF-alpha induced cell death, though the mechanism is unclear (7). ITPK1 as well as IPMK were associated with essential roles in MLKL-dependent necroptosis, a programmed process for necrotic cell death (8). MLKL directly interacts with higher order IPs like IP6, and is important for oligomerization of phosphorylated MLKL and subsequent plasma membrane localization. Mice generated with reduced expression of ITPK1 have neural tube defects (9). Furthermore, polymorphisms in the maternal ITPK1 gene have been associated as risk factors for neural tube defects resulting in spina bifida (10).

  1. Hatch, A.J. and York, J.D. (2010) Cell 143, 1030-1030.e1.
  2. Otto, J.C. et al. (2007) Proc Natl Acad Sci U S A 104, 15653-8.
  3. Desfougères, Y. et al. (2019) Proc Natl Acad Sci U S A 116, 24551-61.
  4. Chamberlain, P.P. et al. (2007) J Biol Chem 282, 28117-25.
  5. Yang, L. et al. (2006) J Cell Sci 119, 1320-8.
  6. Ho, M.W. et al. (2002) Curr Biol 12, 477-82.
  7. Sun, Y. et al. (2003) J Biol Chem 278, 43645-53.
  8. Dovey, C.M. et al. (2018) Mol Cell 70, 936-948.e7.
  9. Wilson, M.P. et al. (2009) Proc Natl Acad Sci U S A 106, 9831-5.
  10. Guan, Z. et al. (2014) PLoS One 9, e86145.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#96006

ITPK1 Antibody

Western Blotting Image 1: ITPK1 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using ITPK1 Antibody (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). Absence of signal for ITPK1 in RL and Hs 578T cells is predicted from RNAseq data and demonstrates the specificity of the antibody for ITPK1.
Western Blotting Image 2: ITPK1 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, mock transfected (-) or transfected with a construct expressing Myc/DDK-tagged full-length human ITPK1 protein (hITPK1-Myc/DDK; +), using ITPK1 Antibody (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: ITPK1 Antibody Expand Image
Immunoprecipitation of ITPK1 protein from ZR-75-1 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is ITPK1 Antibody. Western blot analysis was performed using ITPK1 Antibody. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as a secondary antibody.