Revision 3

#92176Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, W-S

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

35-40, 65

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#Q9GZU1

Entrez-Gene Id:

57192

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Simple Western™ 1:10 - 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Mucolipin-1 recognizes endogenous levels of total mucolipin-1 protein. This antibody detects the carboxyl terminal fragment produced following posttranslational cleavage.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the carboxy terminus of human mucolipin-1 protein. Antibodies are purified by peptide affinity chromatography.

Background

Mucolipin-1 (MCOLN1, TRPML1), a member of the transient receptor potential ion channel superfamily, is a lysosomal/late endosome Ca2+ efflux channel that is important in lysosomal biogenesis (1,2). Mutations in the mucolipin-1 gene are responsible for the human lysosomal storage disease mucolipidosis type IV (MLIV), an autosomal recessive neurodegenerative disease (3). Mucolipin-1 is synthesized as a 580-amino acid protein with six transmembrane domains but can undergo cleavage in the long luminal loop between the first two transmembrane domains (4,5). Mucolipin-1 activity has been linked to autophagy and lysosomal biogenesis. Calcium influx through mucolipin-1 activates CaMKKβ and AMPK, which activate the autophagy kinase ULK1 (6). Calcium influx is also associated with activation of the calcium-dependent phosphatase calcineurin which can trigger activation of TFEB, a key transcription factor regulating autophagy and lysosomal biogenesis (7,8). Mucolipin-1 activity is upregulated by cellular stress, including reactive oxygen species (ROS) (7). Phosphorylation of mucolipin-1 by mTOR results in reduced channel activity and autophagic flux (9). Loss of mucolipin-1 or pharmacological inhibition suppresses autophagy and can reduce tumor growth and metastasis in non-small cell lung cancer and triple-negative breast cancer, suggesting the use of mucolipin-1 antagonists for cancer therapy (10-12).

  1. Zeevi, D.A. et al. (2007) Biochim Biophys Acta 1772, 851-8.
  2. Cheng, X. et al. (2010) FEBS Lett 584, 2013-21.
  3. Mirabelli-Badenier, M. et al. (2015) Metab Brain Dis 30, 681-6.
  4. Kiselyov, K. et al. (2005) J Biol Chem 280, 43218-23.
  5. Miedel, M.T. et al. (2006) J Biol Chem 281, 12751-9.
  6. Scotto Rosato, A. et al. (2019) Nat Commun 10, 5630.
  7. Zhang, X. et al. (2016) Nat Commun 7, 12109.
  8. Zhang, X. et al. (2016) Autophagy 12, 1954-1955.
  9. Onyenwoke, R.U. et al. (2015) Biochem J 470, 331-42.
  10. Yin, C. et al. (2019) Cancer Manag Res 11, 8607-8617.
  11. Xu, M. et al. (2019) Cell Calcium 79, 80-88.
  12. Yang, Y. et al. (2020) Cells 9, 2682-2688.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting W-S: Simple Western™

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#92176

Mucolipin-1 Antibody

Western Blotting Image 1: Mucolipin-1 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using Mucolipin-1 Antibody (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). Negative expression of mucolipin-1 protein in Ramos cells is consistent with the predicted expression pattern.
Western Blotting Image 1: Mucolipin-1 Antibody Expand Image

Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from TT cells using Mucolipin-1 Antibody #92176. The virtual lane view (left) shows the target band (as indicated) at 1:10 and 1:50 dilutions of primary antibody. The corresponding electropherogram view (right) plots chemiluminescence by molecular weight along the capillary at 1:10 (blue line) and 1:50 (green line) dilutions of primary antibody. This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12-230 kDa separation module.