Revision 5

#20229Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

All

SENSITIVITY:

Transfected Only

MW (kDa):

Source/Isotype:

Mouse IgG2b

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:400 - 1:1600

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb detects detects exogenously expressed proteins containing the Myc epitope tag. This antibody recognizes the Myc tag fused to either the amino or carboxy terminus of targeted proteins in transfected cells. Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb detects exogenously expressed Myc-tagged proteins in cells expressed under a CMV promoter. Expression under other promoters has not been evaluated.
The antibody may cross-react with c-myc protein. The antibody may weakly cross-react with a protein of unknown origin at ~90kDa. Low level cross-reactivity was observed using secondary antibodies targeting mouse IgG3, but not mouse IgG1 or IgG2a, by immunofluorescence when used at concentrations above the recommended range.

Species Reactivity:

All Species Expected

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues 410-419 of human c-Myc protein (EQKLISEEDL).

Background

Epitope tags are useful for the labeling and detection of proteins using immunoblotting, immunoprecipitation, and immunostaining techniques. Because of their small size, they are unlikely to affect the tagged protein’s biochemical properties.

The Myc epitope tag is widely used to detect expression of recombinant proteins in bacteria, yeast, insect and mammalian cell systems (1).

  1. Munro, S. and Pelham, H.R. (1984) EMBO J 3, 3087-93.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

Revision 5
#20229

Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb

Western Blotting Image 1: Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, untransfected (-) or transfected with carboxy-terminal or amino-terminal Myc-Tag fusion protein (+), using Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb (upper) and β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower).
Western Blotting Image 2: Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb Expand Image
Western blot analysis of recombinant MYC-MBP at various concentrations using, Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb.
Immunoprecipitation Image 1: Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb Expand Image
Immunoprecipitation of Myc-Tag protein from extracts of 293T cells transfected with a carboxy-terminal Myc-Tag fusion protein. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Mouse (E7Q5L) mAb IgG2b Isotype Control #53484, and lane 3 is Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb. Western blot analysis was performed using Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as the secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HCT 116 cells transfected with a Myc-tagged construct using Myc-Tag (E4F4D) Mouse mAb (yellow; mouse IgG2b), RCAS1 (D8K2E) Mouse mAb #67856 (magenta; mouse IgG1), Lamin A/C (4C11) Mouse mAb #4777 (gray; mouse IgG2a), DyLight 554 Phalloidin #13054 (cyan pseudocolor), and ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).